多聚螯合物酶组化实验——PowerVision 法
| 实验方法原理 | PowerVision 系统的原理是连接抗体上紧密地连接上许许多多的酶分子，呈串珠状排列，由于利用了一种小的呈线性或很小枝状多功能试剂作为骨架分子，与酶和免疫球蛋白交联，排列紧密，形成串珠状多聚物，因此相对分子质量较小。其特点是简便、敏感。其操作流程同 EnVision 法，但一抗的稀释度可在 EnVision 法基础上作进一步稀释。
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| 实验材料 | |
| 试剂、试剂盒 | |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | 1. 4 μm 常规石蜡切片脱蜡至水，PBS 洗 3 min×3 次。 2. 预处理组织切片（可用酶消化或 AR 或不作任何处理，依一抗质量而定）。 3. PBS 洗 3 min×3 次。 4. 0.3％ H2O2 阻断内源性过氧化物酶 15 min，PBS 洗 3 min×3 次。 5. 适当稀释特异性一抗，室温孵育 1 h，PBS 洗 3 min×3 次。 6. 滴加山羊抗小鼠（或兔）IgG-HRP 多聚物（PowerVision），室温孵育 30 min，PBS 洗 3 min×3 次。 7. 0.04％ DAB- 0.03％ H2O2 显色 8～12 min。 8. 水洗后，苏木精衬染 1～3 min，水洗蓝化 5～10 min，盐酸乙醇分化 5 s，水洗 5 min，系列乙醇脱水，常规树胶封片。 9. 观察结果。 展开 |
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