下呼吸道感染微生物检验的标本留取和运送的要求
1．纤维支气管镜标本的采集要求：
纤维支气管镜可采集到感染部位的标本，包括BAL、BS、PSB及支气管穿刺活检标本，均应由呼吸科医师或经培训医师采集；为防止污染，应采用吸入麻醉剂，勿从支气管镜的工作腔中吸取灌洗液标本；标本采集顺序为：BS、BAL、PSB和活检标本，应避免带血。
2．痰、气管吸出物标本的留取：
当有下呼吸道细菌感染指征时，患者在医护人员的指导下先用无菌生理盐水漱口，可减少口腔污染菌的数量，如有假牙应先摘掉；咳出清晨第一口深部痰，留至带螺旋盖的防漏无菌痰杯内。仅当插管患者出现肺炎症状时(如发热或浸润)采集气管吸出物，因气管在插管24 h后即有定植菌，在无肺部感染症状时吸痰送检，培养结果往往与疾病不符。婴幼儿和小龄儿童可吸取气管和支气管的分泌物，常用于诊断细菌性肺炎。
3．标本的运送要求：
临床采集的标本均应尽快送至实验室，实验室对来自急诊、新入院患者和有创方法采集的标本(如：BAL和肺活检标本)要尽快处理，以保证致病菌的活性，避免造成重复采集标本。通常做细菌学检验的标本应在2 h内(室温)送至微生物实验室。延误送检将导致口咽部定植菌过度生长，有临床意义的病原菌数量减少。如需远程运送，建议将标本放置2-8 ℃环境(不超过24 h)，但培养分离到肺炎链球菌等苛养菌的机会和数量将会减少。实验室应在报告中对标本延迟送检或经低温冷藏予以说明，并指出可能对培养结果造成的影响。
4．拒收的标本：
实验室接收标本后，首先筛选并拒收以下不合格标本：24 h内重复采集的痰培养标本、唾液、鼻冲洗液和分泌物、鼻孔拭子、咽部标本、未经保护套管收集的支气管刷培养标本及痰的厌氧菌培养标本。除支气管穿刺吸出物、PSB、活检标本、胸水或其他未经污染的标本外，其余类型的标本均不适合做厌氧菌培养。
5．涂片革兰染色判断标本的合格性：
肺部感染的最常见机制是肺泡内吸入了口咽部定植菌，培养方法的局限性在于敏感性低，且无法判断分离菌是感染或定植。因此，实验室需借助涂片革兰染色方法评估痰标本的质量。此外，涂片还可提高下呼吸道感染病原学诊断的特异性和敏感性，并发现培养不能生长的细菌，是既快速又低成本的方法，但需要实验室人员的丰富经验。
通常标本中上皮细胞的数量代表污染程度，白细胞内或外的优势菌(非黏附在鳞状上皮细胞上)有助于预测肺部致病菌。可接受做培养的痰、支气管吸出物标本包括涂片革兰染色所见：(1)<10个鳞状上皮细胞(SEC)/低倍视野(LPF)，大量多形核白细胞(WBC>25个/LPF)，且存在肺泡巨噬细胞和柱状上皮细胞均提示来自深部痰标本；(2)WBC>25个/LPF，SEC<25个/LPF;(3)WBC∶SEC>10∶1，单一形态的细菌量达到3＋-4＋。不适合做培养的判断：当SEC>10个/LPF，提示标本被唾液污染；还包括当吸痰涂片未见细菌时。
6．涂片可提示与感染相关的信息：
通过涂片革兰染色，实验室应报告临床提示感染的信息，虽然由两种致病菌同时引起的感染不常见，但当两种形态的细菌均与白细胞相关时要报告；即使涂片未见细菌时仍有助于评价患者状况，可能隐藏着某些特殊菌，如军团菌、内源性真菌、结核分枝杆菌或其他可引起非典型肺炎的致病菌；质量合格的标本中，涂片有正常菌群及多种细菌(通常白细胞内有空泡或液泡)，特别当培养生长正常菌群时，报告要提示有吸入性肺炎等。
