测序反应 实验
试剂、试剂盒 循环测序试剂盒引物和模板
仪器、耗材 薄壁 PCR 管热循环仪GeneAmpPCRSystem9700 仪
实验步骤
一、材料
1. 缓冲液和溶液
ABI PRISM Big Dye Terminator Ready Reaction mix(Applied Biosystems) 或其他循环测序试剂盒
2. 核酸和寡核苷酸
引物和模板
3. 特殊设备
DNA 扩增用薄壁 PCR 管
热循环仪,GeneAmp PCR System9700(Applied Biosystems) 仪或相当产品
二、方法
1. 将适量(如上所述)的引物和模板加入到 PCR 管中。
2. 每管加入 4ul Terminator Ready Reaction mix。
这是说明书中推荐用董的一半,这一用董已经足够,而且节省试剂。
3. 用去离子水补至 20ul, 混匀,稍离心。
4. 在 GeneAmp PCR System 9700(Applied Biosystems) 或相当产品的仪器上,执行下列程序。
推荐