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测序反应 实验

2020.8.11

试剂、试剂盒 循环测序试剂盒引物和模板

仪器、耗材 薄壁 PCR 管热循环仪GeneAmpPCRSystem9700 仪

实验步骤

一、材料


1. 缓冲液和溶液


ABI PRISM Big Dye Terminator Ready Reaction mix(Applied Biosystems) 或其他循环测序试剂盒


2. 核酸和寡核苷酸


引物和模板


3. 特殊设备


DNA 扩增用薄壁 PCR 管


热循环仪,GeneAmp PCR System9700(Applied Biosystems) 仪或相当产品


二、方法


1. 将适量(如上所述)的引物和模板加入到 PCR 管中。


2. 每管加入 4ul Terminator Ready Reaction mix。


这是说明书中推荐用董的一半,这一用董已经足够,而且节省试剂。


3. 用去离子水补至 20ul, 混匀,稍离心。


4. 在 GeneAmp PCR System 9700(Applied Biosystems) 或相当产品的仪器上,执行下列程序。


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