m6A RNA甲基化在发表多篇10+文章的运用（三）
（5）酶METTL3作用分子机制
研究已表明Mettl3是一种甲基化转移酶，可以调控靶分子的甲基化水平，那么是如何调节糖代谢过程呢？现有实验已表明Mettl3敲除或过表达不仅影响HK2和SLC2A1的甲基化水平，还调节HK2和SLC2A1的表达水平，这暗示着靶分子甲基化水平影响其表达，而双荧光素酶实验恰好证实了这一点。已有机制表明甲基化可以促进RNA分子的稳定，那HK2和SLC2A1甲基化是否也影响其稳定性呢？作者通过稳定性分析，发现敲除Mettl3降低了HK2和SLC2A1
mRNA的半衰期，也就是说甲基化促进了HK2和SLC2A1
mRNA分子的稳定从而影响其表达。作者进一步通过RIP-qPCR（云序可提供此服务）证实了
IGF2BP2（m6A识别蛋白促进mRNA稳定）与HK2结合，IGF2BP2/3与SLC2A1结合。这些数据揭示了Mettl3介导的m6A修饰通过IGF2BP2依赖和IGF2BP2/3依赖的mRNA稳定性调节，分别增加了HK2和SLC2A1
(GLUT1)的表达。
图8 . 靶分子与识别蛋白的结合
（6）靶分子HK2和SLC2A1功能验证
HK2己糖激酶和SLC2A1（GLUT1）葡萄糖转运体1都是糖酵解途径重要的调节基因，通过回补实验研究HK2和SLC2A1
(GLUT1)是否参与Mettl3在CRC中的生物学功能，HK2或SLC2A1 (GLUT1)过表达恢复了HCT116
Mettl3敲除细胞中乳酸的减少和葡萄糖摄取下降，显然HK2和SLC2A1 (GLUT1)介导了Mettl3在CRC细胞中的调控功能。
图9. 靶分子HK2和SLC2A1功能验证
总结：
综上所述，本文作者通过m6A-seq，RNA-seq，MeRIP-PCR，RIP-PCR等多种技术手段首次发现了m6A修饰与结直肠癌患者糖酵解途径激活密切相关。其机制是HK2和GLUT1受m6A修饰调控并参与结直肠癌的糖酵解激活，而Mettl3介导HK2和GLUT1的m6A修饰依赖于IGF2BPs对调控CRC的发病机制至关重要，所以靶向Mettl3及其通路可能有望用于治疗高糖代谢的结直肠癌患者。
图10. m6A修饰依赖于糖酵解参与结直肠癌发展机制
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