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SEA链交换扩增技术检测单增李斯特菌的性能指标

2020.4.21

基于变性泡介导的链交换扩增技术(Strand Exchange Amplification, SEA)是我公司自主知识产权的新一代等温核酸检测技术,具有简单、快捷、经济、高特异性、高灵敏度,高扩展性等特点,在医疗健康、食品安全、检验检疫、环境监测、动物疫病等领域具有广阔的应用前景。

单核增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)是一种常见的土壤细菌,在土壤中它是一种腐生菌,以死亡的和正在腐烂的有机物为食。它也是某些食物(主要是鲜奶产品)中的一种污染物,能引起严重食物中毒。单核细胞增生李斯特氏菌是一种人畜共患病的病原菌。它能引起人、畜的李氏特菌病,感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多,严重威胁人类的健康,因此单增李斯特菌在食品中的检测尤为重要。

应用SEA技术以单增李斯特菌为研究对象,本团队开发了检测单增的核酸快速检测试剂盒,并将研究结果发表在Anal,Biochem.2018, 545: 38-42 ,结果表明具有产品较高的特异性,检测限可以达到1.0 × 10-14 M,重复性好,可以商品化使用。

特异性和抗干扰能力

 

A: SEA方法的特异性。1-6分别表示的是:以单核细胞增生李斯特菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、副溶血性弧菌、蜡样芽胞杆菌和大肠杆菌O157:H7的增菌液为基础,稀释1000倍后为扩增靶标;7表示NTC。

B: SEA方法的抗干扰能力。1ˊ 表示靶标为稀释1000倍的单核细胞增生李斯特菌的增菌液;2ˊ 表示靶标为增菌液的混合物,即单核细胞增生李斯特菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、副溶血性弧菌、蜡样芽胞杆菌和大肠杆菌O157:H7的增菌液稀释1000倍后,按1:1:1:1:1:1的比例混合。3ˊ 表示NTC。

检测限和重复性

A: 不同浓度的单核细胞增生李斯特菌基因组DNA的实时荧光曲线。1-5分别表示为1.0 × 10-10至1.0 × 10-14 M,稀释10倍,6表示NTC。

B: Tt值与基因组DNA靶标量(CLM)的负对数值之间的关系。误差棒显示三次测定的平均标准偏差。

C: 使用PAGE电泳观察相应的SEA反应产物。

除此之外,我公司在食品安全领域其他致病菌,如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157:H7、副溶血性弧菌、蜡样芽胞杆菌等均有系列核酸检测试剂盒,产品在多省市食药监局盲样抽检中表现优异,已和国内知名食品企业签订战略合作协议,获得良好的客户反应度,欢迎广大客户及经销商采购。


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