双氢青蒿素的检查方法
有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。
临用新制供试品溶液取本品0.25g,置25ml量瓶中,加甲醇适量,超声使双氢青蒿素溶解,用甲醇稀释至刻度,摇匀。对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置200ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀。
系统适用性溶液取双氢青蒿素(出现两个色谱峰)对照品与青蒿素对照品各适量,加甲醇适量,超声使溶解并稀释制成每1ml中含双氢青蒿素与青蒿素各1mg的混合溶液。
色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂( CAPCELL PAK C18MGⅡ,4.6mm×100mm,3pm或效能相当的色谱柱);以水为流动相A,以乙腈为流动相B,按下表进行梯度洗脱;流速为每分钟0.6ml;检测波长为216nm;进样体积20l时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)100系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,调节流动相比例,使青蒿素色谱峰的保留时间约为10分钟,a-双氢青蒿素和β-双氢青蒿素相对青蒿素的保留时间约为0.6和0.8,各成分峰间的分离度均应大于2.0。
测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,大于对照溶液两主峰面积和的0.5倍(0.25%且不大于对照溶液两主峰面积和(0.5%)的杂质峰个数不得多于1个,其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液两主峰面积和的0.5倍(0.25%),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液两主峰面积和的2倍(1.0%),小于对照溶液两主峰面积和0.1倍的色谱峰忽略不计。
干燥失重取本品,置五氧化二磷干燥器中减压干燥至恒重,减失重量不得过0.5%(通则0831)。炽灼残渣取本品1.0g,依法检查(通则0841),遗留残渣不得过0.1%。重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣,依法检查(通则0821第二法),含重金属不得过百万分之十。
