支气管哮喘小鼠气道反应性无创检测方法的建立（四）
二 、 气道反应性的相关性
将反映无创哮喘组和有创哮喘组气道反应性的 Penh 值和 R L 行相关分析得出其相关系数 R = 0. 96 ( P <0 . 01) 。 见图 4 。
三 、 气道炎症
见表 3 。
表 3 各实验组肺泡灌洗液细胞涂片的细胞分类
组别 鼠数 嗜酸粒细胞( %) 中性粒细胞( %) 淋巴细胞( %) 巨噬细胞( %)
无创对照组 8 0 . 38 ± 0 . 52 10 . 63 ± 5 . 18 14 . 75 ± 6. 34 74 . 25 ± 5 . 55
无创哮喘组 10 54 . 00 ± 5 . 96a 7 . 25 ± 2 . 39 10 . 43 ± 5. 07 28 . 33 ± 5 . 64
有创对照组 8 0 . 63 ± 0 . 74 12 . 00 ± 4 . 87 14 . 00 ± 4. 10 73 . 37 ± 6 . 84
有创哮喘组 10 55 . 93 ± 5 . 92b 7 . 73 ± 3 . 55 11 . 88 ± 2. 81 24 . 48 ± 7 . 12
注 :与无创对照组相比 ,aP < 0 . 01 ;与有创对照组相比 ,bP < 0 . 01
讨 论
国外对小鼠气道反应性测定的方法研究颇多 。 最早的为电刺激离体气管平滑肌收缩能力测定 。 由于是离体测定 ,故难以反映气道受刺激后黏液分泌和黏膜水肿等情况 ; 又因为标本只是取自大气道 ,所以不能完全反映小气道病变所引起的肺通气功能障碍 。 1967 年 , Pal ece k 等[ 1 ]
首次建立体积描记法测定肺阻抗 ,此方法是通过气管切开和机械通气的方式进行的 ,因此存在麻醉及手术等影响因素 ,而且不能对同一动物进行反复检测 。 后来 ,L i ke n s 等[ 2 ]将此法改进为经口气管插管 ,实现了重复检测 ,但对小鼠行经口气管插管则有一定的技术难度 。 1979 年 , Pe n noc k 等[ 3 ]建立了双室体积描记法 ,但此法需要限制小鼠活动 , 不适进行长期监测 。 1997 年 , Ha mel ma n n 等[ 4 ]初步建立了无创的单腔整体体积描计法 ,克服了双室体积描记的不足 。 该方法是根据哮喘时 Te 延长 、 表现为呼气末暂停时间延长即 Pe n h 来定量反映气流受限程度 。 但 Pe n h 并不是反映 RL 的一个直接指标 ,目前仍存在不少争议 。
目前国内对哮喘小鼠的评价多数仅立足于气道炎性指标 ,不能完全反映哮喘的病理生理特征 。 本实验率先在国内采用单腔的整体体积描计法检测 BALB/ c 小鼠的气道反应性 ,探讨 Pe n h 作为气道反应性无创检测指标的可行性 ,尝试建立无创高效的气道反应性检测方法 。既往已证实 ,同样方法制作的哮喘模型 ,以有创检测的方式测得的气道反应性已明确高于对照组[ 5 ],本实验的有创哮喘组与对照组相比也同样证实有明显的气道高反应性 。 提示本实验建立的无创的气道反应性检测方法可能与既往经典的有创检测方法有一定的相关性 。 而将反映无创哮喘组和有创哮喘组的气道反应性的 Pe n h 值和 RL 值行相关分析 ,结果非常接近 1 ( P < 0 . 01) ,证实两种方法密切相关 。无创哮喘组从 Mc h 为3 . 12 g/ L 开始出现 Pe n h 明显升高 ,而有创哮喘组从0 . 39 g/ L 就开始呈现这样的变化 ,提示无创方法的敏感性稍低 。 这可能与 Mc h 在有创方法中是通过插管直接作用于下气道 , 而在无创法中要经过鼻部等上气道后才作用于下气道有关 。 但是两组反应性差异无统计学意义 ,说明两种方法测得的反应性相当 。此外 ,在检测小鼠气道反应性过程中 ,行无创方法的小鼠不必麻醉 ,而且每次可以同时检测 6 只小鼠 ,动态观察也不受限 ; 这些在有创方法中都无法实现 。从气道炎性指标上看 ,无创哮喘组和有创哮喘组的嗜酸粒细胞明显高于各自的对照组 ( P < 0 . 01) 。 而本实验所制作的模型是参照我所于 2006 年已成功制作的哮喘模型[ 5 ], 说明该模型的气道炎性有良好的重复性
综上所述 ,以 Pe n h 为主要测定指标的无创肺功能检测方法作为 BALB/ c 雌鼠气道高反应性的检测可行 、 高效 。 至于是否能应用于其他品系的检测 ,还有待论证 ,有报道 Pe n h 在其他种群中敏感性不一致[ 6 ]。
参 考 文 献
[ 1 ] Pal ecek F , Palece ko va M , Aviado DM , et al . Emp hyse ma i n i mmat ur e r at s . Co ndit io n p ro duced by t racheal co nst rictio n a nd papai n . Arch Envi ro n Heal t h ,1967 ,15 : 3322 342 .
[ 2 ] Li kens SA , Ma uderl y J L . E ff ect of ela st a se o r hi st a mi ne o n si ngl e 2br eat h N2 wa sho ut s i n t he r at . J Appl Physiol ,1982 ,52 : 1412 146 .
[ 3 ] Pennock B E , Co x CP , Roger s RM ,et al . A no ni nva si ve t echni que f o r mea sure ment of change s i n specific ai r way re si st a nce . J Appl Physiol ,1979 ,46 : 3992 406 .
[ 4 ] Ha mel ma nn E , Schwa rze J , Ta keda K , et al . No ni nva si ve mea sur ement of ai r way r espo nsi veness i n all er gic mice usi ng ba ro met ricplet hysmograp hy. Am J Re spi r Crit Ca re Med ,1997 ,156 ( 3 Pt 1) : 7662 775 .
[ 5 ] 何胜东 ,赖克方 ,姚卫民 ,等. 小鼠哮喘模型气道反应性检测方法的建立. 广东医学 ,2006 ,27 : 16592 1661 .
[ 6 ] Adler A , Cie slewicz G , Ir vi n C G. Unre st rai ned plet hysmo grap hy i s a n unrelia ble mea sure of ai r way re spo nsi vene ss i n Bal b/ c a nd C57BL/ 6mice . J Appl Physiol ,2004 ,97 : 2862 292 .
