血清总IgE和嗜酸性粒细胞检测在过敏性皮肤病中的临床
摘要
目的：探讨血清总lgE及EOS水平在过敏性皮肤病中的分布及临床意义。
方法：采用HITACHI7170A全自动生化分析仪和BECKMAN COULTER GEN．S全自动血细胞分析仪分别检测100例过敏性皮肤病患者血清总lgE和血液EOS水平，并对结果进行统计分析。
结果：100例过敏性皮肤病患者中血清总IgE水平(阳性率)分别为：过敏性紫癜组(453.1±283.3)IU/ml(12/31，38.71％)，湿疹组(531.3±224.5)IU/ml(16/20，80.00％)，药疹组(489.7±285.2)IU/ml(9/19，47.37％)，荨麻疹组(476.1±211.1)IU/ml(7/15，46.67％)，接触性皮炎组(514.0±263.6)IU/ml(9/15，60.00％)；血液EOS水平(阳性率)分别为：过敏性紫癜组(0.31±0.55)×109/L(6/31，19.35％)，湿疹组(1.17±1.60)x109/L(11/20，55.00％)，药疹组(0.48±0.48)x109/L(6/19，31.58％)，荨麻疹组(0.46±0.52)×109/L(4/15，26.67％)，接触性皮炎组(0.57±0.73)×109/L(5/15，33/33％)，除过敏性紫癜组外，湿疹组、药疹组、荨麻疹组以及接触性皮炎组血清总IgE及EOS水平均显著高于正常对照组(P<0．05)，但各组lgE值与EOS计数在统计学上均未发现明显相关性(-0.54<r<0.24)。
结论：血清IgE及血液EOS在大多过敏性皮肤病的发生、发展中分别起到一定的作用，能在一定程度上帮助了解患者过敏的状态，为临床上过敏性皮肤病的早期诊断、综合治疗以及疗效评价提供依据。
关键词： 过敏性皮肤病；总lgE；嗜酸性粒细胞；乳胶增强免疫透射比浊法
过敏性皮肤病主要是由于过敏原通过吸入、食入或接触等途径进入人体后引发机体产生变态反应，从而导致相应的一系列临床症状，主要表现为湿疹、荨麻疹、过敏性紫癜、药疹以及多种多样的皮炎等。随着社会快速发展，人们生活方式和生活环境的改变，以及生活水平的提高等。过敏性皮肤病发病率不断上升。过敏性皮肤病病因复杂，临床上往往因为病因不明确而反复发作，给病人的生活和工作带来极大的困扰。甚至引起心理问题，如抑郁、焦虑等[1,2]。Vandenbulcke L等[3]研究发现IgE在某些过敏性疾病的发生发展中起重要作用。目前对于检测总IgE水平或EOS计数对于过敏性皮肤病的诊断、治疗及预后意义的看法不一，有学者认为血清总IgE升高不一定是过敏，而过敏性皮肤病患者血清总IgE水平也不一定不高，相对特异性IgE而言其检测价值不高[4]。也有学者认为血清总IgE及血液EOS在过敏性皮肤病的发病中起重要作用，其检测可为诊断和治疗过敏性皮肤病提供依据[5]。为了探讨血清总IgE和嗜酸性粒细胞(EOS)水平在过敏性皮肤病中的临床意义，本研究检测了100例过敏性皮肤病患者和20例正常人血清总IgE含量和EOS水平，对数据进行统计分析，现将结果报告如下。
材料与方法
1．1病例资料
100例过敏性皮肤病患者均系2011年2-4月湘雅医院皮肤科门诊及住院病人，符合文献[6,7]诊断标准。其中男47例，女53例，年龄1~85岁，平均年龄34.2岁，病程3d～17年。依疾病种类分为5组，分别为：①过敏性紫癜(aller-gic pttrpttra，AP)组，31例；②湿疹(eczema)组，20例；③药疹(drug eruption，DE)组，19例；④荨麻疹(urticaria)组，15例；⑤接触性皮炎(contact dermatitis，CD)组，15例。正常对照组20例均系湘雅医院健康体检者，其中男10例，女10例，平均年龄37.0岁，无过敏性疾病及家族过敏史，无寄生虫感染史。所有标本均经湘雅医院伦理委员会批准。静脉采血5ml，其中2ml用EDTA-2Na抗凝，3ml注入促凝管，室温放置30min，4000r/min离心4min，分离血清，-20℃保存备用。所有受试患者在受试前2周内均未服用糖皮质激素。
1．2 仪器与试剂
总lgE用日立7170A全自动生化分析仪检测，试剂由日本电化生研株式会社提供；静脉血嗜酸性粒细胞(EOS)计数用BECKMAN COULTER GEN．S全自动血细胞分析仪检测，试剂采用原装配套试剂，均严格按照仪器与试剂说明书操作。
1．3参考范围
血清总lgE：0.0～358.0IU/ml，EOS计数：(0.05-0.50)x109/L。
1．4统计学处理
数据处理采用SPSS17．0软件，总IgE值及EOS计数组间比较采用t检验，计量资料以均值±标准差(x±s)表示，总IgE值及EOS计数异常增高例数进行组间比较采用卡方检验，总IgE值与EOS计数的关系采用相关性分析。
结果
2．1 各组血清总lgE测定结果
见表1。100例过敏性皮肤病患者血清总IgE平均为(488.3±256.5)IU/ml，显著高于正常对照组总IgE水平(P<0．05)，其中有53例大于358.0IU/ml，占患者总数的53.00％。将各组过敏性皮肤病患者血清总lgE值与正常对照组经t检验比较发现：湿疹组、药疹组、荨麻疹组和接触性皮炎组血清总IgE水平均显著高于正常对照组(P<0.05)，而过敏性紫癜组与正常对照组相比较差异无统计学意义(P>0.05)。各组疾病中lgE阳性率最高的为湿疹组(80.00％)，经卡方检验，湿疹组的lgE阳性率显著高于过敏性紫癜组(卡方=4.76，P<0.05)，药疹组(卡方=4.51，P<0.05)，荨麻疹组(卡方=4.23，P<0.05)，而与接触性皮炎组的IgE阳性率相比差异无统计学意义，该结果表明过敏性皮肤病中湿疹患者的血清总lgE值增高较为多见，其他多种过敏性皮肤病患者血清检测也可出现IgE值增高，但比例不是很高。
注：与正常对照组比较：#P<0.05；与湿疹组比较：*P<0.05
2．2各组过敏性皮肤病患者与正常对照组血液EOS测定结果
见表2。100例过敏性皮肤病患者血液EOS计数平均为(0.57±0.91)x109/L，显著高于正常对照组EOS水平(P<0.05)，其中有32例大于0.5×109/L，占患者总数的32.00％。
将各组过敏性皮肤病患者血液EOS计数与正常对照组经t检验比较发现：湿疹组、药疹组、荨麻疹组、接触性皮炎组血液EOS水平均显著高于正常对照组(P<0.05)，过敏性紫癜组与正常对照组相比较差异无统计学意义(P>0.05)。
注：与正常对照组比较：#P<0.05
2．3 血清总IgE值与血液EOS计数的关系
各组过敏性皮肤病患者血清总IgE和血液EOS计数阳性率结果见图1。图中显示各组过敏性皮肤病患者血清总lgE值升高均伴有EOS计数升高，但将各组的血清总IgE值与血液EOS计数进行相关性分析，结果均未发现显著相关性(-0.54<r<0.24)。
讨论
正常人血清总IgE含量较低，大多数血清IgE低于200IU/ml，因此，必须用灵敏度高的方法才能准确对其进行检测。目前测定血清总IgE含量的报道多采用酶联免疫测定法(EIA)，EIA法操作繁琐，反应时间长，抗原或抗体过量时可出现假阳性反应，不能保证抗原抗体沉淀完全，影响因素较多，定量的准确度不够高，结果的稳定性较难控制，不容易实现自动化操作。本文中测定过敏性皮肤病患者血清总IgE值所使用的乳胶增强免疫透射比浊法。采用致敏的胶乳颗粒，增大了抗原抗体的反应面积，提高了反应的灵敏度，拓宽了检测线性，具有准确度高、敏感性和稳定性好、方便快捷的优点，可以更好地满足临床诊疔的需要，适宜在有自动化生化分析仪的医疗机构推广使用。郭建晖[8]通过乳胶增强免疫比浊法测定了过敏性疾病患者的血清总IgE含量，井与EIA法进行了比较，发现乳胶增强免疫透射比浊法检测血清IgE的准确性和精确度均明显优于ELA法。本研究通过乳胶增强免疫透射比浊法检测血清总IgE的含量和电阻抗法计数外周血中EOS水平来反映过敏性皮肤病的发病情况，为临床诊断及治疗摄供了较为科学的依据。
皮肤是人体最大的免疫器官，受体内外因素以及先天和适应性免疫反应的影响，许多皮肤疾病。如荨麻疹、接触性皮炎、湿疹等都是由免疫反应介导的。过敏性皮肤病是皮肤病中的常见病和多发病，其病因和发病机制较为复杂，给临床上诊断、治疗和预防带来困难。现已知过敏原经皮肤或粘膜表面进入机体后．可活化B细胞等抗原呈递细胞，活化的B细胞对胞内摄取的过敏原进行加工处理，井将处理后的碎片呈递给能识别过敏原-MHCII类分子复合物的Th2细胞，随后Th2被诱导并活化产生IL一4、IL一5、IL一13等细胞困子，其中IL一4、IL一13可激发免疫球蛋白E重链恒定区的基因转录，诱导B细胞IgE的合成，而IL一5日刺激骨髓释放嗜酸粒细胞人血[9]，引起血清IgE或EOS值升高，进而引发一系列过敏反应。此外，Rosenwasser LJ等[10]也研究发现，IL一4日以增强B细胞等抗原呈递细胞膜表面的低亲和力受体(FcεⅡ)的表达以及促进可溶性低亲和力IgE受体(sFcεⅡ)的产生，而FcεⅡ的表达增强以及FcεⅡ的产生过多均可使体内IgE的合成增加。体内合成的IgE与肥大细胞及嗜碱性粒细胞膜表面上的高亲和力受体(FcεⅡ)结合，当其与相同的过敏原再次接触时，可刺激上述细胞脱颗粒，释放活性炎症介质(如组胺、白三烯、血小板活化因子以及细胞趋化因子等)，这些炎症介质作用于皮肤黏膜处，引起毛细血管扩张、血管通透性增强等，表现为过敏性皮肤病的红斑，丘疹、水疱等症状。这些都表明血清总IgE含量升高在过敏性皮肤病的发病中其有重要推动作用，对临床上过敏性皮肤病的诊断具有一定价值。本次研究发现53.00％的过敏性皮肤病患者血清总IgE升高，其中以湿疹和接触性皮炎最为明显，经统计分析表明：除过敏性紫癜组外，湿疹组，药疹组、荨麻疹组、接触性皮炎组血清总IgE水平均显著高于正常对照组(P<0.05)，且湿疹组的IgE阳性率显著高于过敏性紫癜组(卡方=4.76，P<0.05)，药疹组(卡方=4.51，P<0.05)，荨麻疹组(卡方=4.23，P<0.05)，也支持了这一结论。另外，目前通过下调血清IgE水平(如使用抗一IgE抗体)来治疗过敏性疾病已经取得一定的进展，如Rabinevitch N[11]等使用静脉内免疫球蛋白能明显减少Th淋巴细胞因子分泌，从而降低血清IgE水平，同时还具有协同糖皮质激素使用的作用，已治疗过敏性疾病。Hellman L尚研究用抗IgE的疫苗去除血清中特异性IgE(sIgE)以治疗变应性疾病[12]。此外，Holgate S[13]等研究发现omalizumab(专门作用于靶IgE重组人单克隆抗体)可与血清中游离IgE结合并且下调肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面FcεR I的表达，从而减少过敏原的呈递，Th2细胞的活化与增殖，在过敏性哮喘和鼻炎的治疗中效果较好并且较为安全，强调了IgE在过敏性疾病发病机制中的重要作用。以上分析充分说明血清总IgE在过敏性皮肤病的发病机制中起重要作用。
此外，本次还研究发现32.00％的过敏性皮肤病患者血液EOS计数升高，经统计分析后，除过敏性紫癜组外，湿疹组、药疹组．荨麻疹组、接触性皮炎组血清总IgE水平均显著高于正常对照组(P<0.05)，说明EOS水平升高在过敏性皮肤病的发病中也起一定作用。研究发现，EOS可分泌大量具有高度毒性的神经毒素成分，包括主要碱性蛋白(major basic protein，MBP)、嗜酸性粒细胞过氧化物酶素(eosinophil peroxidase，EPO) 、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(eosinophil cationic protein，ECP)，这些物质可引起过敏性皮肤病的组织损伤和瘙痒[14]。何平平[15]等研究发现：趋化细胞因子是过敏性皮肤病中非常重要的介质，而eotaxin和RANTES是嗜酸粒细胞的最重要的趋化细胞因子，因而抑制嗜酸粒细胞的浸润是抗过敏的一种策略。这些进一步说明了嗜酸性粒细胞在过敏性疾病发病中的重要作用。本研究还发现某些过敏性皮肤病血清IgE水平增高多伴有血液EOS计数升高，但经统计分析各组疾病却并未发现二者的明显相关性。故而推测在过敏性皮肤病发病机制中，IgE和EOS可能各自独立发挥作用。
综上所述，作者认为血清IgE及血液EOS在大多过敏性皮肤病的发生、发展中分别起到一定的推动作用，能在一定程度上帮助临床了解患者过敏的状态，并为临床上过敏性皮肤病的早期诊断、综合治疗以及疗效评价提供了参考依据。
作者单位：1中南大学湘雅医院检验科(湖南长沙410008)；2中南大学湘雅医学院医学检验系
作者简介：易斌(1969一)，男，博士，主任技师，主要从事临床生化检验和I临床实验室质量管理工作。
