矛头腹蛇血凝酶的效价测定方法
酶活力标准品溶液取1支矛头腹蛇血凝酶标准品(供效价测定用),精密加水lml使溶解并定量稀释制成每1ml中各约含0.2、0.5、1.0、2.0、3.0单位的溶液。供试品溶液精密称取本品适量,加水溶解并定量稀释制成每1m中约含1.0单位的溶液测定法取凝血质控血浆混悬液[凝血质控血浆(MDChemostasis)放至室温,每支加水2.0ml,放置15分钟,期间间或轻摇,每次使用前轻轻摇匀]0.1ml,分别加入20支试管中并置凝血分析仪中,37℃士0.5°C条件下预热2分钟,精密量取系列浓度的标准品溶液各0.2ml,迅速加入上述各试样管中,记录凝固时间,每种浓度重复测定4次,计算平均值(4次测定最大值与最小值之差不得超过平均值的10%,否则重测)。以标准品溶液浓度的对数为横坐标,凝固时间对数为纵坐标,计算线性回归方程(相关系数应大于0.99)。取供试品溶液,照上法测定,从回归方程求得供试品溶液浓度,并计算每1mg中矛头腹蛇血凝酶活力矛头腹蛇血凝酶单位定义:37℃±0.5℃条件下,每2ml酶溶液使0.2ml凝血质控血浆混悬液,在58~62秒出现白色絮团的酶量,以酶溶液的浓度计,定义为每1ml酶溶液中含矛头腹蛇血凝酶1个单位。蛋白质取本品适量,精密称定,照蛋白质含量测定法(通则0731第二法)测定,计算每1mg中蛋白质的量(mg)。比活力本品矛头腹蛇血凝酶活力单位除以蛋白质的量mg),即得。
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