复方甘草片的含量测定方法
吗啡照高效液相色谱法(通则0512)测定。固相萃取柱的前处理、系统适用性试验与要求取固相萃取柱1支(用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂),依次用甲醇水(3:1)15m1与水5ml冲洗,再用pH值约为9的氨水溶液(取水适量,滴加氨试液至pH值为9)冲洗至流出液pH值约为9,待用。精密量取每1ml中约含吗啡对照品50μg的5%醋酸溶液1ml,置处理后的固相萃取柱上,以供试品溶液中相同的洗脱条件洗脱,用5ml量瓶收集洗脱液至刻度,摇匀,作为固相苯取柱系统适用性溶液。精密量取该溶液与对照品溶液各10l,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。固相萃取柱系统适用性试验结果(fs)按下列公式计算,应在0.97~1.03之间Ax/C系统适用性试验结果(fs)式中Ax为系统适用性溶液中吗啡峰面积;AR为对照品溶液中吗啡峰面积;Cx为系统适用性溶液浓度;CR为对照品溶液浓度供试品溶液取本品30片,精密称定,研细,精密称取约10片量,置磨口锥形瓶中,精密加水90ml,超声5分钟,精密加稀盐酸(6→-10)10ml,摇匀,超声20分钟使吗啡溶解,取出,放冷,滤过;精密量取续滤液1ml,置处理后的固相萃取柱上滴加氨试液适量使柱内溶液的pH值约为9(上样前,另取同体积的续滤液预先调试,以确定滴加氨试液的量),摇匀,待溶剂滴尽后,用水约20ml冲洗,以含2%甲醇的5%醋酸溶液洗脱,用5ml量瓶收集洗脱液至刻度,摇匀。对照品溶液取吗啡对照品适量,精密称定,加含2%甲醇的5%醋酸溶液溶解并定量稀释制成每1m中约含10μg的溶液。色谱条件用辛基硅烷键合硅胶为填充剂;以50mmol/L磷酸二氢钾溶液-2.5mmol/L庚烷磺酸钠溶液-乙腈(5:5:2)为流动相;检测波长为220nm;进样体积20l。系统适用性要求理论板数按吗啡峰计算不低于1000。测定法精密量取供试品溶液和对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。按外标法以峰面积计算。甘草酸照高效液相色谱法(通则0512)测定。溶剂甲醇-水(1:1)。供试品溶液取本品20片,精密称定,研细,精密称取约1片量,置50ml量瓶中,加溶剂适量,超声30分钟使甘草酸溶解,取出,放冷,用溶剂稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液对照品溶液取甘草酸铵对照品适量,精密称定,加溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.15mg的溶液。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以25mmol/L磷酸二氢钾溶液-2.5mmol/L庚烷磺酸钠水溶液-乙腈(33:33:44)为流动相;检测波长为250nm;进样体积10dl。系统适用性要求理论板数按甘草酸峰计算不低于2000,甘草酸峰与相邻色谱峰之间的分离度应符合要求测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图。按外标法以峰面积计算,并将结果乘以0.9797。
