脑脊液的理学检查—显微镜检查（一）
脑脊液的理学检查
一、颜色
正常脑脊液无色透明，但新生儿因血液中胆红素的移行，故CSF标本的颜色几乎都是黄色。在中枢神经系统发生感染、出血、肿瘤等，CSF中出现过多的白细胞或红细胞和其他色素，使得颜色发生改变。常见的颜色主要有下列几种：
1、红色 CSF中混有血液时，因红细胞溶解、破坏，可使标本呈现红色，常见于穿刺损伤出血、蛛网膜下腔出血和脑出血。穿刺损伤出血仅见于最初几滴为红色，以后逐渐变清晰，CSF离心后其上清无色透明，显微镜下见红细胞完整，形态无改变或皱缩，取其上清液作隐血试验，由于红细胞未溶解，没有游离血红蛋白产生，故呈阴性结果。蛛网膜下腔出血或脑出血，其CSF呈均匀红色，离心后上清液仍显淡红色或黄色，显微镜下见红细胞呈锯齿状或皱缩，红细胞并有破坏，上清液作隐血试验，由于存在游离血红蛋白，呈阳性结果。新鲜出血与陈旧出血的鉴别见表2。
2、黄色 CSF中含有变性血红蛋白或多量蛋白质，或因颅内静脉血运和脑脊液循环郁滞，致使CSF呈黄色，颇受临床医生重视。主要见于下列情况：
（1） 陈旧性蛛网膜下腔出血和脑出血，由于红细胞被破坏，出血5、6小时后即可出现黄色，停止出血后，这种黄色仍可持续3周左右。
（2）椎管梗阻，如髓外肿瘤，当脑脊液蛋白质含量超过1.5g/L时，颜色变黄，其黄色的程度与蛋白质含量成正比，梗阻部位越低，变黄更明显。
（3）化脓性脑膜炎、重症结核性脑膜炎和脊髓肿瘤，此时CSF内的蛋白质含量可明显升高。
（4）重症黄疸，如核黄疸、甲型肝炎、肝硬化、钩端螺旋体病、胆道梗阻、新生儿溶血病等，一般CSF内胆红素浓度超过8.5μmol/L时，即可被黄染。
（5）CSF中含有黄素、类胡萝卜素、脂色素和黑色素等。亦可使CSF呈现黄色。
3、米汤样乳白色 由于白细胞或脓细胞增多所致。常见于各种化脓性细菌引起的化脓性脑膜炎。
4、绿色 见于绿脓杆菌、肺炎链球菌、甲型链球菌所引起的脑膜炎。
5、褐色或黑色 见于中枢神经系统（尤其是脑膜）黑色素肉瘤或黑色素瘤等。
表2 新旧出血的鉴别
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鉴别 新鲜出血 陈旧出血 |
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外观 混浊，易形成凝固物 较透明 离心沉淀 上清液无色透明 上清液红、褐或黄色 红细胞形态 无变化或皱缩 有改变 白细胞数 不增加 继发性或反应性增 |
二、混浊度（透明度）
正常脑脊液清晰透明。CSF中如果白细胞总数超过300×106个/L时，则变得混浊。蛋白质含量增高或含有大量细菌、霉菌等，也可使其变得混浊，如结核性脑膜炎时CSF呈毛玻璃状，化脓性脑膜炎时呈脓样等。
检验结果报告时，一般用“清亮”、“微混”和“混浊”等来描述。
三、凝块或薄膜
凡是可能有纤维蛋白析出的CSF标本，如临床上疑为结核性脑膜炎时，应保留标本，最好静置24小时，观察有无凝块和薄膜形成。
正常脑脊液放置24小时不形成薄膜，无凝块和沉淀。当CSF内蛋白质（包括纤维蛋白原）增加至10g/L时，可出现薄膜或凝块。化脓性脑膜炎往往在1~2小时内形成薄膜、凝块或沉淀。结核性脑膜炎在12~24小时形成膜状物。神经梅毒可以出现小絮状凝块而不形成薄膜。蛛网膜下腔阻塞时，其远端部位的CSF因蛋白质含量高常呈现黄色胶冻状。
检验结果报告时，一般按“无凝块”、“有凝块”、“有薄膜”等报告。
四、比密（比重）
CSF比密的测定方法与尿比密的测定基本相同，常用的方法是折射仪法。正常成人CSF的比密为1.006~1.008。
五、pH
pH的测定用微量pH计测量，正常成人CSF的pH微7.35~7.40。
脑脊液的显微镜检查
一、 细胞总数
1、直接计数法 如脑脊液标本比较清亮或微混，可用此方法。
用滴管吸取已混匀的脑脊液标本少许，直接滴入细胞计数板，充入计数池内，静置2~3分钟，低倍镜下计数两个池内的四角和中央大格共10个大格内的细胞数，即为1μl脑脊液中的细胞总数（红、白细胞总数）。在书写报告时，再换算成每升脑脊液中的细胞总数。
2、稀释计数法 如果脑脊液的细胞过多、混浊或带血的脑脊液可用血红蛋白毛细吸管吸取混匀的脑脊液20μl，加入有红细胞稀释液0.38μl的小试管中，混匀后滴入计数池内，用低倍镜计数4个大方格的细胞总数，乘以50，即为每微升脑脊液的细胞总数，最后换算成每升脑脊液的细胞总数报告。
二、白细胞计数
1、直接计数 非血性标本，用吸管吸取冰乙酸后全部吹出，使管壁仅附着少许冰乙酸，然后用同一吸管吸取少量混匀的脑脊液标本，数分钟后红细胞就会完全溶解，再滴入计数池内，按上法计数。
2、稀释计数 如白细胞过多，可用白细胞稀释液稀释后，按上法计数，注意计数结果应乘以稀释倍数。
3、血性标本的校正计数 混有血液的脑脊液标本混匀后，用1%的冰乙酸溶液稀释后仍按上法计数。为了剔除因出血而带来的白细胞，可用下式进行校正。
每微升CSF内白细胞校正数=每微升CSF未校正的白细胞数－
三、白细胞分类计数
1、直接分类法 在白细胞直接计数后，转高倍镜观察，依据细胞形状和细胞核的形态进行分类，共计数白细胞和内皮细胞100个，分别计算单个核细胞和中性粒细胞所占的比例，以百分数表示。如白细胞总数不足100个，则直接写出单个核细胞和中性粒细胞的具体数字。如白细胞总数在30以下，可不做直接分类计数或改用染色分类计数。
2、染色分类法 脑脊液标本离心，取沉淀涂片，制成均匀薄膜，置室温或37℃孵箱中，干燥后以瑞氏染色，油镜下进行分类计数。以百分比表示之。如有内皮细胞，则另行描述报告。
