PCR实验室SOP文件（七）
传递窗的使用及维护标准操作程序
1.目的：保证待处理样品的可靠性传递，尽量避免各区间的空气污染
2.适用范围：每个区的传递窗
3.职责：所有工作人员在工作中必须严格遵守。
4．步骤：
4.1标准操作：实验人员在所在实验区处理好样品后，欲将样品传递到下一区域时，打开传递窗门，放入欲传递的样品，关闭传递窗门。
4.2 维护
4.2.1 每次实验结束后用1﹪的施康溶液对传递窗内部进行清洁，然后打开传递窗内的紫外灯消毒30分钟，并记录紫外灯照射时间，累计10000小时后报废，更换新的紫外灯。
5. 本SOP的变动程序：本SOP的变动，可由任一使用该文件的工作人员提出，报上级负责人，如通过则公布实行。
仪器故障时的标记、放置标准操作程序
1.目的:保证故障仪器明显地区别于正常仪器，而不被错误使用。
2.适用范围:核酸扩增荧光检测实验室内的各种仪器。
3.操作人:钟磊
4.步骤:
4.1找到出现故障的仪器。
4.2用黄牌故障标志标示故障仪器。
4.3小型仪器送仪器部门维修。
4.4大型贵重仪器关闭电源开关，取下电源插头,用相应防尘罩遮蔽仪器。
4.5维修完成后取下黄色故障标记，换上未校准标记牌。
4.6调试实验通过，去掉未校准标记牌。
4.7仪器重新正常使用贴“运转”标志。
5.本SOP的变动程序:本SOP的变动，可由任一使用该文件的工作人员提出，报
上级负责人，如通过则公布实行。
临床标本的采集标准操作程序
1.目的：确保样品检测准确、有效。
2.该SOP适用范围： 血标本、分泌物、痰液的采集。
3.操作:
3.1 血清
用无菌注射器抽取受检者静脉血1.5毫升，注入PCR专用的一次性试管（不得与其他生化标本混用），于室温离心，吸取上清即为血标本。
3.2 分泌物
男性：取尿道分泌物用细小棉拭子伸入尿道约2～4厘米，略捻拭子取出分泌物（应略带黏膜）。将分泌物或棉拭子置入无菌玻璃管，用无菌棉球将试管塞紧后，密闭送检。
女性：阴道---用无菌生理盐水棉球洗去宫颈外分泌物，再用无菌棉拭子插入宫颈内，停5秒钟后旋动棉拭子采取宫颈分泌物，将棉拭子置入无菌玻璃管，用无菌棉球将试管塞紧后，密闭送检。
女性：尿道---用无菌生理盐水棉球洗净尿道口，再用无菌棉拭子插入尿道约2厘米，略捻拭子取出分泌物（应略带黏膜）。将棉拭子置入无菌玻璃管，用无菌棉球将试管塞紧后，密闭送检。
3.3 痰液
用灭菌5ml玻璃管取受检者肺深部咳出痰液1～3毫升，密闭，即为标本。标本可立即用于测试。
4本SOP的变动程序:本SOP的变动，可由任一使用该文件的工作人员提出，
报上级负责人，如通过则公布实行。
标本验收和保存的标准
1.目的:保证所收集的标本符合实验要求;保证标本的保存质量。
2.适用范围:核酸扩增荧光检测实验室现行检测项目：HBV-DNA、HCV-RNA、TB-DNA、CT-DNA等。
3.操作人:王塞女、胡玲
4.验收、保存程序:
4.1 验收步骤
4.1.1签收：严格执行对各类样本的查对，对送检样本及时进行验收、查对，不符合要求的样本一律退回，并填写”金华人民医院检验样本退检反馈单”。
4.1.2 分类验证
4.1.2.1 一般内容：进入实验室的样本在进行编号(或贴条码)
、离心前，工作人员应再次认真查对姓名、联号、住院号、病区床号、项目等。对不符合要求者应作记录，并及时通知采样科室，正确及时地补采样，以免延误病人的检测结果报告。对书写不清楚的申请单，当事者要及时与病房联系(可电话)，明确受检者姓名、住院号、性别、年龄、病区、床号和检验项目等。
4.1.2.2 按检测项目验证标本
a）HBV：所需标本类型为未溶血的血清或血浆，用无菌真空试管（由检验中心统一提供）采集，注意血浆标本所用的抗凝剂，一般用EDTA-K2或枸橼酸钠，不可使用肝素。标本为全血时及时分离出血浆保存。
b）CT：用无菌真空试管（由检验中心统一提供），取病患部位的棉拭子。
c）TB：最好是晨起第一口痰(不能为唾液)、胸腹水、脑脊液、脓液或穿刺液用无菌真空试管（由检验中心统一提供）采集。
d) HCV:采血清：用无菌真空试管（由检验中心统一提供），采样后尽快（最迟2h内）送到实验室。血浆也可用，但不可用肝素抗凝。
4.1.3 符合拒检的不合格病人标本的范围
未正确使用抗凝剂的标本；严重溶血及静脉营养时严重脂血并影响检测结果的血标本；血量不足检验需要量的标本；经查对,标本的病人姓名、年龄、性别及检验号联等有不相符者；采集的标本将严重影响检验结果者（例如检测项目TB的标本是唾液而不是晨痰）等其它情况。
4.1.4 拒检程序
a）对拒检的不合格标本应登记在拒检样本登记本上。
b）填写不合格标本反馈单，并随同申请单送返送检单位。
c）必要时电话告之相关科室医生或护士。
4.2 标本的保存
4.2.1HBV、：全血标本2-6℃当天保存，血清标本保存于-20℃，保存7天。
4.2.2 TB：液化的痰标本如果不立即用于核酸提取，保存于-20℃，保存7天。处理后的痰或胸腹水、脑脊液、脓液用于TB检测的标本置于2-6℃当天保存。
4.3 特殊标本处理
对暂不检测的项目和规定时间外收到的零散样本，要随时登记和交班，以免漏检，遗失和延误检验。对特殊样本或特殊病人的样本，实行“首接”负责制，所谓特殊样本是指难于采集的样本，以及特殊病人的样本一律实行“首接”负责制，无论那位工作人员，一旦收到样本后，均须负其责任，不得以任何借口推托，及时和正确保管和转送样本到有关实验室或有关人员，同时作交班记录和双签名。对于做长期病情动态考察的病人标本一律置于-20℃下保存1-3个月，使用时再按需取出检测。
6. 本SOP的变动程序：本SOP的变动，可由任一使用该文件的工作人员提出，
报上级负责人，如通过则公布实行。
样品编号的标准操作程序
1.目的:保证样品编号的唯一性，也是准确发放报告的基础。
2.适用范围:使用核酸扩增荧光检测实验室所开展的四种检测项目：乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、沙眼衣原体、结核杆菌。
3.操作人:王塞女、胡玲
4.编号方法:
4.1基本原则
4.1.1按检测类型分类标记：根据检测项目的不同，每种检测项目对应一种唯一的代号。如乙型肝炎病毒标记为HBV、结核杆菌标记为TB等。
4.1.2按检验申请单的条型码顺序编号：按唯一编号原则编号,如:
2004年9月1日HBV-DNA检测第2号样本即：040901B02。
2004年9月1日TB-DNA检测第2号样本即：040901T02。
编号时要核对申请单条码是否与样本条码一致。
4.1.3特殊标本的编号：如有特殊情况，应在标记前面增加特异字母区别开。
4.2编号步骤
4.2.1先统计所有当天送来的标本，根据编号的基本原则，按类型、按顺序给当天的标本编好号，每个样本的每个检测项目对应一个唯一的编号。
4.2.2用标记笔在每张验单和对应的样品管上作好相同的标记。
4.2.3在样本统计簿上作好记录，每个样本的记录都应包括以下信息：送检日期、科室、病人姓名、检测项目、样本编号、实验结果（看当天的检验报告管理电子文件）等。
4.2.4处理好样品、点样后，按照上述顺序排布，将反应管放入扩增仪上相应位置，开始扩增。
4.2.5扩增得到结果后，先在统计簿上填入结果，作好记录，再一一把实验结果填入相应检验报告单。
4.2.6经复核后发放结果报告单。
7. 本SOP的变动程序:本SOP的变动，可由任一使用该文件的工作人员提出，
报上级负责人，如通过则公布实行。
