细菌室操作规程(七)
肠杆菌科
一、常规鉴定
肠杆菌科虽然有100多个种,在临床常见的不过是其中的一部分,约20余种。从临床标本中分离的频率较高的是大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌。对3个菌种的鉴别鉴定,实验室可用常规的方法,一般不困难。其他菌种应按规程的操作从属到种的步骤进行。
(一)与其他科属细菌的鉴别
革兰阴性杆菌除了肠杆菌科外,还有弧菌科和非发酵菌。所以,肠杆菌科的鉴定首先应注意与这些菌的鉴别。可用形态、葡萄糖氧化或发酵、氧化酶、鞭毛等特性加以区别,见表。
表 肠杆菌科与其他科菌的区别
试 验 肠杆菌科 弧菌科 非发酵菌
葡萄糖 F F 0/-
氧化酶 - + + *
形态 杆状 弧形 杆状
鞭毛 周毛或无 单毛 单、丛毛、周毛、无
注:*,不动杆菌、嗜麦芽黄单胞菌除外。
(二)肠杆菌科的初步分群
可用两个试验将肠杆菌科初步分为二大类,即苯丙氨酸脱氨酶试验和葡萄糖酸盐试验(也可用V-P试验),见表:
表 肠杆菌科初步分类
菌 属 名 苯丙氨酸 葡萄糖酸盐 菌 属 名 苯丙氨酸 葡萄糖酸盐
变形杆菌属 + - 埃希菌属 - -
普罗威登斯菌属 + - 志贺菌属 - -
摩根菌属 + - 沙门菌属 - -
克雷伯菌属 - + 枸橼酸杆菌属 - -
肠杆菌属 - * + * 爱德华菌属 - -
沙雷氏菌属 - + 耶尔森菌属 - -
哈夫尼亚菌属 - +
注:·有例外。
(三)苯丙氨酸阳性菌属及种的鉴别
苯丙氨酸阳性、葡萄糖酸盐阴性的有变形杆菌属、普罗威登斯菌属、摩根菌属。
1.各属的鉴别:变形杆菌属、普罗威登斯菌属、摩根菌属的区别可用H2S、鸟氨酸、枸椽酸盐三个试验,其鉴别见表:
表 苯丙氨酸阳性的各属鉴别
试 验 变形杆菌属 普罗威登斯菌属 摩根菌属
H2S + - -
鸟氨酸 +/- - +
枸椽酸盐 +/- + -
2.变形杆菌属种的鉴别:变形杆菌属常见有三个种即普通变形杆菌、奇异变形杆菌、潘尼变形杆菌。产粘液变形杆菌仅从活的或死的吉普赛蛾幼虫中发现,与人类的关系未见报道。鉴别见表。
表 变形杆菌属内种的鉴别
试 验 普通变形杆菌 奇异变形杆菌 潘尼变形杆菌
靛基质 + - -
鸟氨酸 - + -
麦芽糖 + - +
3.普罗威登斯菌属种的鉴别:该属临床常见有3个菌种,即产碱普罗威登斯菌、斯图普罗威登斯菌、雷极普罗威登斯菌,其鉴别见表:
表 普罗威登斯菌属内种的鉴别
试 验 产碱普罗威登斯菌 斯图普罗威登斯菌 雷极普罗威登斯菌
尿素 - -/+ +
蕈糖 - + -
侧金盏花醇 + - +
4.摩根菌属的鉴定:摩根菌属常见1个种,即摩根摩根菌,其鉴定见”苯丙氨酸阳性的各属鉴别表”。
(四)苯丙氨酸阴性、葡萄糖酸盐阳性各属及种鉴别
1.葡萄糖酸盐阳性各属的鉴别:这类细菌有克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、哈夫尼亚菌属。可用动力、山梨醇、DNase、棉子糖等试验将其区别(见表)。
表5-3-28 葡萄糖酸盐阳性的各属的鉴别
试 验 克雷伯菌属 肠杆菌属 沙雷菌属 哈夫尼亚菌属
动力 - + + +
山梨醇 + +/- + -
Dnase - - + -
棉子糖 + + +/- -
枸橼酸盐利用 +a + + -
鸟氨酸脱羧酶 -d +b +c +
注:a.鼻硬结亚种、臭鼻亚种的某些菌株阴性。
b.聚团肠杆菌阴性。
c.芳香沙雷菌生物2群、普城沙雷菌、深红沙雷菌阴性。
d.解吗氨酸克雷伯菌阳性。
2.克雷伯菌属种的鉴别:克雷伯菌属有肺炎克雷伯菌(亚种)、臭鼻亚种、鼻硬结亚种、产酸克雷伯菌。肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌是临床中分离较多的,二者的区别在靛基质。另外,两个亚种虽然临床不多见,但已从臭鼻患者、呼吸道慢性病患者以及鼻硬结患者中分离到,因此,鉴别它们也是有一定的临床意义。可用甲基红、赖氨酸、丙二酸盐鉴别(见表5—3—29)。
表5-3-29 克雷伯菌属种的鉴别
试验 产酸克雷伯菌 肺炎克雷伯菌
肺炎亚种 臭鼻亚种 鼻硬结亚种
靛基质 + - - -
甲基红 - - + +
枸椽酸盐 + + -/+ -
赖氨酸 + + -/+ -
丙二酸盐 + + - +