乙酸激酶的测定实验
基本方案
| 实验方法原理 |
ATP：乙酸磷酸转移酯（AK） 乙酸+ATP→乙酰磷酸+ADP 这个反应可以与丙酮酸激酶（PK）偶联，乳酸脱氢酶（LDH）反应如下： |
|---|---|
| 实验材料 | 酶样品 |
| 试剂、试剂盒 | 三乙醇胺-HCl KOH 乙酸钠 ATP MgCl2 磷酸烯醇式丙酮酸 LDH PK |
| 仪器、耗材 | 分光光度计 |
| 实验步骤 |
实验所需「试剂」具体见「其他」 0.98 ml 实验混合物 0.02 ml 酶样品 25 ℃ 时，于 340 nm 处吸收值降低，ε340＝6.3×103 l/（mol·cm）。
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| 注意事项 | |
| 其他 |
试剂： 0.1 mol/L 三乙醇胺-HCl/KOH，pH 7.6（三乙醇胺-HCl，用 1 mol/L KOH 调节 pH 7.6） 2 mol/L 乙酸钠（Mr＝82.0；16.4 g 溶于 100 ml 水中） 0.1 mol/L ATP（二钠盐，三水合物，Mr＝605.2；605 mg 溶于 10 ml 水中） 0.1 mol/L MgCl2（六水合物，Mr＝203.3；203 mg 溶于 10 ml 水中） 0.01 mol/L 磷酸烯醇式丙酮酸（PEP，三环己基铵盐，Mr＝465.6；46 mg/10 ml） LDH，20 mg/ml，约 500 U/mg PK，10 mg/ml，500 U/mg
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