电穿孔转染真核细胞实验
电穿孔转染哺乳动物细胞
植物原生质体细胞
| 实验材料 | 哺乳动物细胞 |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | 完全培养液 电穿孔缓冲液 |
| 仪器、耗材 | 电穿孔仪器 电击池 |
| 实验步骤 |
1. 在完全培养液中培养特转染细胞至对数生长晚期，4℃ 640 g 离心5 min，收集细胞。
2. 将细胞沉淀用其半量体积的预冷电穿孔缓冲液重悬洗涤，4℃ 640 g 离心5 min。
6. 将电击池放入电穿孔装置的架上用所设定的电压及电容值电击一次或多次。
7. 将电击池置于冰上10 min。
8. 用非选择性完全培养液20倍稀释被转染的细胞，并用该液洗电击池以移出所有的被转染细胞。
9. 对于稳定转染，在非选择培养液中培养细胞48h （大约2代），然后转入含有抗生素的 培养液中。
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