IT21疑难降解检材DNA分析试剂盒相关问题汇总
IT21疑难降解检材DNA分析试剂盒自推出以来，国内多家权威用户在实际案例中使用本试剂进行了分型和研究，解决了疑难降解DNA检材的分型难题；在此就用户关心的相关问题解答如下：
1.IT21适用于哪些检材？
无毛囊发干，陈旧性骨骼等DNA含量低或高度降解的检材；
2.IT21的原理？
IT21的分型方法是基于逆转座子（Retrotransposable
Elements，RE）的多态性，逆转座子是主要在RNA转换为cDNA的过程中发挥作用的DNA序列，它位于常染色体上，大小在2-500bp，占常染色体40%左右。它是DNA表达的调控序列，包含缺失和插入的序列，每个个体间存在不同的序列，特别适合用于个体识别。
3.每套试剂盒可用于检测多少个样品？
采用推荐的25ul扩增体系，可检测50人份；
采用国内常用的10ul扩增体系，可检测100人份；
4.IT21所需设备有哪些？
IT21不需要额外购买任何设备，它适用于目前DNA实验室常规平台，例如9700/3130、3500、3500xl等。
5.采用IT21试剂盒与线粒体测序相比有哪些优势？
操作简单，时间短；
不需要额外设备的支持，适用于实验室常规平台；
双等位基因分析系统，分析简单；
6.是否经过国内权威机构测试？
经过公安部二所，上海803，武汉市局，北京东城分局等多家机构测试。
7.为什么扩增片断可以低至60-125bp?
超短引物设计方案，上游引物（FC）可直接扩增插入或缺失位点序列，而将下游引物分为两种，一种是插入片段引物（RI），可以和部分插入序列结合，从而扩增出插入位点序列；另一种是缺失片段引物（RN），该引物只能和无插入序列的位点结合；每个位点对应三条引物，从而不用将插入序列完全扩增下来，大大降低了扩增产物的大小，增加了对高度降解检材扩增的成功率。具体如下图：
7.为什么IT2灵敏度远高于传统STR分型?
IT21的分型方法是基于逆转座子（Retrotransposable Elements，RE）的多态性，逆转座子主要在RNA转换为cDNA的过程中发挥作用，它位于常染色体上，大小在2-500bp，占常染色体40%左右。而常规STR分型是基于常染色体上的短重复序列（short tandem repeat）的多态性，短重复序列长度在100-400bp，占常染色体的10%左右。因此，基于“拷贝数”较高的逆转座子多态性的检测方法可以检测更低拷贝的DNA检材，经验证可低至30pg，理论上灵敏度相对于传统STR分型可高近百倍。
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