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药物研发早期阶段EarlyToxTM心肌毒性检测试剂盒...(三)

2020.6.02

与钙染料比较

多种钙离子指示染料以及其各自在细胞跳动、平均峰值振幅以及峰值频率等方面的作用进行了4小时长时间的实验比较。这些染料包括EarlyTox心急毒性染料, FLIPR. Calcium 5 试剂盒 (Molecular Devices)和Fluo-4 Direct 试剂盒(Invitrogen)。根据供应商产品说明,染料加入iPSC 心肌细胞中共孵育。使用FLIPRTetra系统对加样前和加样后几个时间点的结果进行记录。此实验中同时设置了对照孔。如图6 和7 中所示, 所有EarlyTox 心急毒性染料的峰值频率和信号振幅均是最高的。图8 中可以看到,EarlyTox 心急毒性染料对化合物添加后4 小时内细胞跳动能力(消失)没有影响。FLIPR Calcium 5 染料作用下的多数细胞停止跳动,而Fluo-4 Direct 染料在加入化合物90 分钟后所有孔均停止跳动。

 

 

 

结论

EarlyTox 心肌毒性染料已进行优化,可以提供更强信号、高通量方法来检测药用化合物对干细胞分化的心肌细胞的效应。优化了的染料成分可以产生更大的信号窗口和显著的降低试剂自身对心肌跳动、峰值频率或信号振幅等随着时间变化的很小的非特异性毒性作用,有别与其它类型的试剂染料。EarlyTox 心肌毒性染料配套FLIPRTetra 系统使用,是药物研发早期检测化合物心肌毒性和确证潜在心脏候选药物发现的强大工具。


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