荧光素钠的鉴别检查方法
鉴别
(1)取本品的水溶液(1→2000)1滴,点于滤纸上,即生成黄色斑点,趁湿置溴蒸气中,1分钟后再使与氨蒸气接触,斑点即变为深粉红色(2)本品的水溶液显强烈的荧光,用大量的水稀释后仍极明显;但加酸使成酸性后,荧光即消失;再加碱使成碱性,荧光又显出。(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集273图)一致。如不一致时,可取本品0.1g,加水0.1ml,用玻棒搅拌使完全溶解,于105℃千燥4小时后测定。(4)本品炽灼灰化后显钠盐的鉴别反应(通则0301)
检查
碱度取本品0.20g,加水10ml使溶解,依法测定(通则0631),pH值应为7.0~9.0有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定溶剂乙腈水(15:85)。供试品溶液取本品适量,精密称定,加溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置200m量瓶中,用溶剂稀释至刻度,摇匀对照品溶液取间苯二酚(杂质Ⅰ)对照品与邻苯二甲酸(杂质Ⅱ)对照品适量,精密称定,加溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中各约含2.5g的混合溶液。色谱条件用辛基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6mm250mm,5μm);以磷酸盐溶液(取磷酸二氢钾1.22g,加水溶解并稀释至1000ml,用磷酸调节pH值至2.0)为流动相A,乙腈为流动相B,按下表进行梯度洗脱;检测波长为220nm;柱温为30℃;进样体积20l时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)458515系统适用性要求对照品溶液色谱图中,杂质Ⅰ峰与杂质Ⅱ峰之间的分离度应大于5.0测定法精密量取供试品溶液、对照溶液与对照品溶液分别注人液相色谱仪,记录色谱图。限度供试品溶液色谱图中如有与对照品溶液色谱图中杂质Ⅰ或杂质Ⅱ保留时间一致的色谱峰,按外标法以峰面积计算,均不得过0.5%;其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.6倍(0.3%),其他杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积(0.5%),小于对照溶液主峰面积0.1倍的峰忽略不计。氯化物取本品0.10g,加水5oml使溶解,加稀硝酸1ml摇匀,静置10分钟,使荧光素钠沉淀完全,滤过至澄清。分取滤液二份,每份10m,分置50ml纳氏比色管中,其中一份加水使成40ml,加硝酸银试液1.0ml,摇匀,在暗处放置10分钟,如显浑浊,滤过至澄清,取滤液加入标准氯化钠溶液7.0ml,加水至50ml,摇匀,作为对照溶液。另一份加水使成40ml,加硝酸银试液1.0ml,加水至50ml,摇匀,作为供试品溶液。取对照溶液和供试品溶液,在暗处放置5分钟,依法检查(通则0801),供试品溶液与对照溶液比较,不得更浓(0.35%)。硫酸盐取本品0.20g,加水100ml使溶解,加稀盐酸7ml,使荧光素钠沉淀完全,滤过至澄清。分取滤液二份,每份25ml,分置50ml纳氏比色管中,其中一份加水使成40ml,加25%氯化钡溶液5ml,摇匀,在暗处放置10分钟,如显浑浊滤过至澄清,取滤液加人标准硫酸钾溶液2.5ml,加水至50ml,摇匀,作为对照溶液。另一份加水使成40ml,加25%氯化钡溶液5ml,加水至50ml,摇匀,作为供试品溶液。取对照溶液和供试品溶液,在暗处放置10分钟,依法检查(通则0802)。供试品溶液与对照溶液比较,不得更浓(0.50%)。水分取本品,照水分测定法(通则0832第一法1)测定,含水分不得过17.0%锌盐取本品0.10g,加氯化钠的饱和水溶液10ml溶解后,加稀盐酸2ml,摇匀,滤过,滤液中加亚铁氰化钾试液1ml不得发生浑浊。
