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2-DE 蛋白质组学的 PROTICdb 数据库实验(六)

2020.8.24

( 18 ) 当移动鼠标到两个链接的蛋白点之一上时,与这个点链接的每个点的十字标记的颜色都变成橙色 (在另一块胶上有一个匹配的蛋白点)。当鼠标点到这些点中的一个时,只有包括在同一个网络中的点显示橙色( 图 23-12)。你可以通过声明一个新的关系,确认这些数据,这样就可以扩大点的网络。

( 19 ) 关闭 DV02121001 凝胶,再重新开启(同时按 Alt p 键,或按照第 3 和第 5 步的描述操作)。

( 20 ) 在 DV02121001 凝胶中寻找 1757 号蛋白点(按照第 7 步描述操作)。

( 21 ) 同步显示这两个凝胶图像(按照第 8 到 10 步中的描述操作)。

( 22 ) 确定 ident 显示方式是被激活的(见第 5 步 ) 。凝胶信息摘要显示在每一个凝胶窗口的右上角,报告被检测和鉴定过的蛋白点的数目。在 DV02041611 凝胶上,用红十字标记的点代表有 9 个点已被鉴定过。在 DV02121001 ( DLFM 02121001) 凝胶上,尽管有一个点被红十字标记 1386 号蛋白点,但没有蛋白点被鉴定过。这些明显相互矛盾的数据说明了蛋白点的网络设施:DV02121001 凝胶上的 1757 号点是被鉴定出来的 ( 因为已经用红色十字标出),因为它与另一个已被鉴定出来的点关联(在这个实验中先前创建的关系)。然而,在右上角的摘要栏里只报告那些已经过质谱分析的点,这样 PROTICdb 通过自动知识库分析工具更新蛋白点的注释。

( 23 ) 把鼠标移到 DV02121001 凝胶上的 1757 号红点上。鉴定结果以蓝色文本文件输出,意味着这个注释是从另一个相关点的信息中推导出来的。在鉴定结论的上方显示这个特定的关系。

( 24 ) 左键点击 DV02121001 凝胶上的 1757 号红色点。显示点的信息内框。

( 25 ) 完善关系和鉴定目录,关系随着建议的鉴定信息一起报告。出现一个如何得到这个鉴定的警示信息。

( 26 ) 与 DV02041611 凝胶上的 1647 号点进行比对。

3. 量化数据输出

点的量化数据 (面积、峰高或体积)可以列表文件格式输出,而且很容易导入到任何电子制表软件或统计包中。

( 1 ) 访问 PROTICdb 主页,并登录网页。

( 2 ) 开启凝胶浏览器,主菜单—凝胶浏览(见注释 16)。

( 3 ) 从菜单工具栏中,选择 Tools→Projects  data   export 或同时按 Ctrl  d 。 跳出数据输出框(在数据输出之前没必要加载任何凝胶图像)。

( 4 ) 选择你要输出数据的项目。

( 5 ) 选择编号系统(见注释 17)。在一个既定的编号系统内比较那些共享相同号码的蛋白点才有意义。选定了编号系统,就会显示一张数据集表格。每张凝胶的蛋白点的检测方法名称和量化方法名称都会被标示出来。用户可以导出用相同方法处理的数据。

( 6 ) 通过复选相应的内容框,选择将要被导出的数据,然后点击 OK。

( 7 ) 选择面积、体积或峰高。你也可以选择一个缺失数据的代码。点击 OK。

( 8 ) 选择结果导出方法:表格、剪贴板或文件。行显示点,列显示胶(条件)。


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