ionKey/MS优化血浆中缓激肽SPE LC-MS/MS定量检测方法
对多肽类物质进行稳定、灵敏分析的需求是色谱分离和质谱测定的共同挑战。常见的肽通常难以通过LC-MS/MS进行分析，这是因为其不易离子化以及不易产生理想的碎片离子而导致MS灵敏度较低，从而使得LC和样品制备方法开发非常困难。之前的应用纪要（720004833ZH）详细说明了如何开发一种快速、灵活的SPE-LC-MS/MS分析方法，用于人血浆中缓激肽（图1）的定量；缓激肽是临床前或药物开发阶段重要的生物标志物1。由于缓激肽在血浆中的浓度低至pg/mL水平且代谢速度快，在采血和样品制备过程中还可通过蛋白水解人为生成，因此对其进行准确定量相当困难。
在本实验中，使用ionKey/MS系统更新了整个LC-MS平台，新系统把UPLC®分析集成到质谱源中（图2）。如图3所示，iKey分离装置（150 µm内径）包含流路、电子元件、ESI接口、加热器、eCord和色谱填料以发挥UPLC分离性能。此外，与2.1 mm内径色谱法进行比较，这种技术可显著提高灵敏度，是肽分析的理想方法。大多数生物分析LC-MS/MS方法常常消耗大量的溶剂和样品，从而增加了分析的成本和限制了可重复分析次数。除灵敏度增加外，ionKey/MS减少溶剂和样品耗量，提供足够的样品进行重复进样，更好的满足ISR测试需求。
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