HLA基因分型方法:PCR-SSP法
PCR-SSP法
1)提取DNA
同前RFLP法
2)PCR扩增
操作方法基本同PCR-RFLP,但引物是根据各等位基因的核苷酸序列设计的特异性引物,主要是针对第二外显子区域的多态性,用SSP扩增出来的产物具等位基因特异性。
3)凝胶电泳
取PCR扩增的产物与上样缓冲液混合,加入2%琼脂糖凝胶加样孔中,其内加入溴化乙锭,在电压15V/cm凝胶条件下电泳20min,然后在紫外灯下照相分析结果。
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3)凝胶电泳
取PCR扩增的产物与上样缓冲液混合,加入2%琼脂糖凝胶加样孔中,其内加入溴化乙锭,在电压15V/cm凝胶条件下电泳20min,然后在紫外灯下照相分析结果。