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为什么使用丙酮沉淀蛋白质,要在低温0-4℃进行

2023.9.21

丙酮沉淀蛋白质是一种常用方法,在温度较高和沉淀时间过长都容易引起蛋白质变性,丙酮沉淀蛋白质要求一定在低温下进行,一般
-20——4
度,不仅加丙酮需在冰浴上进行,离心时也要用低温离心机。时间一般不超过4h,温度低可延长时间。温度较低蛋白质沉淀较快。
在蛋白质溶液中加入大量中性盐,蛋白质胶粒的水化层即被破坏,其所带电荷也被中和,从而使蛋白质发生沉淀,这种盐析沉淀蛋白质的优点是不发生变性,硫酸铵沉淀蛋白质即为盐析作用;而在蛋白质中加入丙酮等有机溶剂,可破坏蛋白质的水化膜而使其沉淀,在常温下,有机溶剂沉淀蛋白质往往引起变性。

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