血液分析仪的细胞直方图分析
近年来,随着科学技术的飞速发展及计算机在血液分析仪中的广泛应用,各种先进的血液分析仪在国内逐渐普及.这种仪器不仅能检测更多的实验参数.而且还提供相应的细胞分布直方图. 国内使用的血液分析仪主要是利用阻抗原理进行细胞计数的.如前所述,不同体积的血细胞,因其电阻大小不同,而产生相应大小的脉冲,分别进入到仪器设置的不同通道(体积段),以通道(单位:飞升) 为横坐标,相应的细胞数为纵坐标描绘出直方图.分析细胞直方图的变化对临床诊断有重要意义.
一 正常直方图
1.Coulter JT-IR 型血液分析仪
Coulter JT-IR 型血液分析仪的正常直方图
正常直方图特征:
①WBC:仪器在35～450fl范围内分析白细胞,从中白细胞直方图上可以明显地看到三个细胞分布区,左侧又高又陡的峰,跨越35～90fl,定为 淋巴细胞峰,以成熟淋巴细胞为主要特征细胞,最右侧又低又宽的峰,从 160fl开始,最远跨越到450fl,定为中性粒细胞峰,以中性粒细胞为主要 特征细胞,也可包含杆状核和晚幼粒细胞.在两个峰之间的平坦区,从30 ～160fl 看上去似两个峰之间的谷,定为单个核细胞区,以单核细胞为主 要特征细胞. 正常外周血中的白细胞以淋巴细胞、单核细胞和粒细胞为 主，白细胞直方图呈现图3-1中的正常形态。图上方的含义报告显示"Normal Distribution"，分类参数后面没有任何字母标记。某种细胞 的百分率是其图上面积与AL+AM+AG的比值.
Coulter JT-IR 型血液分析仪白细胞分类模示图
正常白细胞出现在35fl以上,低于35fl应是无颗粒的.而且在淋巴细胞与单核细胞之间,单核细胞与中性粒细胞之间均存在一个低谷.如果这些特征消失或出现其它变化,均会出现相应部位的"R"报警.
“R”警号的含义：
R1(提示白细胞直方图上，淋巴细胞峰左侧区域有异常)：可能存在聚集的血小 板、巨大血小板、有核红细胞、未溶解的红细胞、蛋白或脂类颗粒
R2(提示白细胞直方图上，淋巴细胞峰与单核细胞区之间的区域有异常)：可能 存在异型淋巴细胞、浆细胞、非典型淋巴细胞、原始细胞、嗜酸粒细胞增 多、嗜碱粒细胞增多
R3(提示白细胞直方图上，单核细胞区与中性粒细胞峰之间的区域有异常)：可 能存在未成熟的中性粒细胞、异常细胞亚群、嗜酸细胞增多
R4(提示白细胞直方图上，中性粒细胞峰右侧区域有异常)：表示中性粒细胞绝 对值增高
RM(多部位报警)：表示同时存在两个或两个以上的"R"报警。
②RBC:仪器在36～360fl范围内分析红细胞,正常红细胞主要分布在50～ 200fl范围内,从正常的红细胞直方图上，可以看到两个细胞群体：即红细胞 主群:从50fl偏上一点开始，有一个看似两侧对称，较为狭窄的正态分 布曲线。 和大细胞群:位于主群右侧，约分布在125～200fl 区域。 图上 含义报告显示"Normal Distribution"，各参数后面无任何字母标记。仪
③PLT:器在2～20fl范围内分析血小板.正常血小板呈对数正态分布, 主要集中在2～15fl内.它包含两条曲线，一条是2～20fl的直接计数曲线。 另一条是电子拟合线，后者在图上的显示范围为0～36fl 。 图上含义报告显示 "Normal Distribution"
2.CELL-DYN 1400型血液分析仪
CD-1400型血液分析仪正常直方图
正常直方图特征:
①WBC:仪器在35～350fl的范围内分析白细胞,其中35～98fl定为淋巴细胞, 98～350fl定为非淋巴细胞(单核细胞+粒细胞). 直方图在上端连成曲线状其中某种细胞的百分率是其图上面积与AL+AG的比值,.
CD-1400型血液分析仪分类模示图
正常白细胞出现在35fl以上,低于35fl应是无颗粒的,而且在淋巴细胞与非淋巴细胞之间设置有一个正常的标准. 如果被测试标本的白细胞直方图上的某个位置粒度分布超过了这个设置的标准,就会出现相应的"R"报警.
"R"警号的含义如下:
LYM RO或RM:指<35fl区域的淋巴细胞数超过了设置的正常标准，表示可能存在有核红细胞、血小板凝块、大血小板、未完全溶解的红细胞、冷球蛋白
LYM R1或RM:指>35fl区域的淋巴细胞数超过了设置的正常标准，表示可能存在淋巴细胞增多、淋巴细胞减少、冷球蛋白
LYM R2或RM:指<98fl区域的淋巴细胞超过了正常标准，表示可能存在淋巴细胞增多、淋巴细胞减少、浆细胞、非典型淋巴细胞（>3%）、原始细胞、 嗜碱粒细胞(>5 %)
GRAN R2或RM:指>98fl区域的颗粒细胞超过了正常标准， 表示可能存在淋巴细胞增多、单核细胞增多(15%)、嗜碱粒细胞增多(5%)、嗜酸粒细胞增多(10%)、浆细胞、非典型淋巴细胞(3%)、原始细胞、杆状核(10%)、 中性粒细胞增多、无颗粒的中性粒细胞(20%)、中性粒细胞减少、血小板凝块(大)、 溶血过度、溶血不足
②RBC:仪器在50～250fl范围内分析红细胞。正常红细胞主要分布在50～200fl范围内,呈偏态分布,50fl以前有一个很小的图形,这是血小板.如果红细胞体积大小发生变化或异质性改变,均可见红细胞直方图左移或右移或出现双峰.
③PLT:仪器在2～30fl范围内分析血小板, 直方图上正常血小板集中在 2 ～ 15fl范围,呈左偏态分布,在25～30fl处,曲线逐渐接近横坐标, 如果标本内有小红细胞,大血小板,聚集的血小板等干扰,均可从其直方图上反映出来,并显示"URI"或"LRI"报警.
URI:指20～24fl颗粒范围(血小板与红细胞之间)的血小板数超过正常标准, 表示可能存在:大血小板、血小板凝块、小红细胞、细胞碎片、纤维蛋白
LRI:指2～3fl颗粒范围的血小板数超过了正常标准,表示可能存在:小血小板细胞碎片、冷球蛋白、红细胞包涵体、电噪音干扰
3.AC系列血液分析仪
AC-900系列血液分析仪正常直方图
正常直方图的特征:
①WBC:仪器在35～420fl范围内分析白细胞,其中35～100fl定为淋巴细胞, 100～135fl定为中值细胞(包括单核细胞,嗜酸性粒细胞,嗜碱性粒细胞), 135～4 20fl定为中性粒细胞.直方图在上端不连成曲线状,而是直接以脉冲大小显示,右侧与横坐标重合.其中某种细胞的百分率是其图上面积与AL+AM+AG的比值,见所示.
AC-900系列血液分析仪分类模示图
正常白细胞出现在35fl以上,低于35fl是无颗粒的,而且在淋巴细胞与中性粒细胞之间有一定宽度的平坦区(中值细胞区).如果某种细胞增多或减少,或有异常细胞,白细胞直方图就会发生相应的改变,但无报警信号显示( 仪器也无此项功能)
②RBC:仪器在30～250fl范围内分析红细胞.正常红细胞主要集中在50～ 200fl之间,且呈左偏态分布.如果红细胞体积大小发生变化或异质性改变, 均可见红细胞直方图左移或右移或出现双峰.
③PLT:仪器在2～20fl范围内分析血小板.正常血小板集中在2～15fl范围,呈左偏态分布,在20fl处,脉冲线很低.改变标本内有小红细胞、大血小板、 聚集的血小板等干扰，在直方图上20fl处的脉冲线会增高。
4.Sysmax F-800血液分析仪
正常直方图特征：
Sysmax F-800血液分析仪正常模示图
①WBC:仪器在30～300范围内分析白细胞。 在正常直方图上可见两个明显的细胞亚群，但无报警显示。直方图上还有两条与纵坐标平行的虚线，左侧虚线为低鉴别器线（LD），由仪器在30～60fl范围内自动设置；另一条虚线为波谷鉴别器线（T），仪器根据不同的标本自动寻找波谷确定这条线； 高鉴别器线（UD）在图上未显示，一般固定在300fl处。在LD与T之间的小细胞群定为淋巴细胞，T与UD之间的大细胞群定为非淋巴细胞（粒+单），所示。
Sysmax F-800血液分析仪分类模示图
白细胞直方图上各种报警的含义：
L:低鉴别器误差。指该部位的颗粒分布超过了预设限度，表示可能存在大血 小板或聚集的血小板，此时白细胞计数及分类均不准确。
F:小细胞群与大细胞群区分不明确，虽能分类，但分类结果不准确。
T:波谷鉴别器未找到。白细胞不能分类，但不影响白细胞计数的准确性。
U:高鉴别器误差。指该部位的颗粒分布超过了预设的限度。表示可能是溶血 剂用量不够或存在异常细胞；如为前者，则白细胞计数及分类结果均不准确。
②RBC:仪器在35～250fl范围内分析红细胞。正常红细胞主要集中在50～150fl范围，呈左偏态分布。直方图上有两条与纵坐标平行的虚线，左侧虚线为低鉴别器线（LD），由仪器在25～75fl范围内自动设置；右侧虚线为高鉴别器线（UD）,由仪器在200～250fl范围内自动设置。
红细胞直方图上各种警号的含义:
L:低鉴别器误差。指该部位的红细胞分布超过了预设限度， 表示可能存在噪声干扰、红细胞碎片、聚集的血小板，此时红细胞计数值不准确。
U:高鉴别器误差。指该部位的红细胞分布超过了预设限度。在绝大多数 情况下是噪音干扰，此时红细胞计数值不准确。
M:找到多峰。指红细胞有两个或两个以上的分布峰。
D:指红细胞分布宽度（RDW）分析失败。
③PLT:仪器在2～30fl范围内分析血小板。正常血小板呈左偏态分布， 主要集中在2～20fl范围内。在直方图上也有两条与纵坐标平行的虚线； 左侧虚线为低鉴别器线（LD）,由仪器在2～7fl范围内自动设置； 右侧虚线为高鉴别器线（UD），由仪器在12～30fl范围内自动设置。
血小板直方图上各种警号的含义：
L:低鉴别器误差。指该部位的血小板分布超过了预设限度，在大多数情况 下是噪音干扰或有聚集的血小板。
U:高鉴别器误差。指该部位的血小板分布超过了预设限度。最大的可能是 噪音干扰。
M:指血小板有两个或两个以上的分布峰。
D:指血小板分布宽度（PDW）分析失败。
从上述四个厂家的血液分析仪的正常血细胞直方图可以看出，这些仪器所描绘直方图是不相同的。这是因为不同厂家生产的血液分析仪，因其所设置的通道数不同，使用试剂的性能不同所致。即使同一份血样在不同的仪器上得到的直方图也不同。以白细胞直方图为例，进行白细胞直方图分析时，首先要注意血液分析仪的厂家及型号。
五 分析细胞直方图时应注意的问题
1.如上所述，分析细胞直方图的变化对临床诊治具有重要意义， 但影响 直方图变化的因素是多方面的。反映直方图变化的脉冲的大小除了与细胞本 身体积的大小有关外，还与试剂的性能（如稀释液的电导率、渗透压、离子 强度；溶血剂的种类、浓度、用量和溶血时间）及仪器出厂前所固定的阈值、 孔电流和脉冲的增益等有关，白细胞计数时的脉冲大小与上述各种因素都有 关系；而红细胞和血小板计数时的脉冲大小只与稀释液的性能和仪器的设置 有关，与溶血剂的性能无关。原装溶血剂是厂家根据仪器本身的性能特点而 特殊配制的与仪器的性能相匹配的专用试剂，因此，在检测细胞时能得到最 佳直方图。以Cell-DYN 1400型血液分析仪的白细胞直方图为例所示。普通稀释液加原装溶血剂得到的白细胞 直方图的粒细胞左移100～200fl之间的平坦区消失，并有"R2"报警，这与配 套的原装试剂得到的直方图有明显的差别。因此，应尽量使用原装试剂。
2.注意了解各种试剂的作用。不同的试剂在细胞计数过程中的作用不同， 稀释液主要作用是在稀释血液的同时为血细胞提供一个与血浆性质近似的环 境，以保证在一定的时间内维持血细胞原有的体积不变；同时为细胞计数提 供一个导电环境。溶血剂的主要作用是用来测定血红蛋白和计数白细胞。在 测试过程中，加入的溶血剂一方面溶解红细胞，释放出血红蛋白，并与之结 合成稳定的血红蛋白衍生物；另一方面作用于白细胞，使其胞质渗出，胞体 收缩，便于白细胞计数及分类。因此，试剂性能的好坏直接影响血细胞直方 图的变化。以AC-920为例，不同性能的溶血剂，可得到不同的白细胞直方图,不合格溶血剂的白细胞直方图分布于 35～190fl内，且淋巴细胞峰与粒细胞峰聚集在一起，中间平坦区消失，MID 值增高，这与合格溶血剂的白细胞直方图有明显的差别。因此，了解试剂在 血细胞测定中的作用，对于正确分析直方图具有重要意义。
3.注意由白细胞直方图得到的白细胞分类结果不能代替常规方法的白细 胞分类结果。由仪器白细胞分类原理可知，仪器对白细胞的分类不同于常规 的涂片染色分类。常规分类除细胞大小外，还要根据细胞的染色反应，核的 形态及染色质的着**况，胞质的着色及颗粒，才能确定为五类细胞。而血 液分析仪的白细胞分类只是根据溶血剂处理后的细胞大小而分为三种细胞群 体。白细胞直方图的变化反映的只是某种体积的颗粒，即某种大小的细胞， 而不是某种特殊细胞的变化。因此，不能用仪器分类代替常规方法的分类。 但在白细胞直方图及计数值均正常的情况下，可作为一种筛选方法。
不合格溶血剂的白细胞直方图分布于 35～190fl内，且淋巴细胞峰与粒细胞峰聚集在一起，中间平坦区消失，MID 值增高，这与合格溶血剂的白细胞直方图有明显的差别。因此，了解试剂在 血细胞测定中的作用，对于正确分析直方图具有重要意义。
3.注意由白细胞直方图得到的白细胞分类结果不能代替常规方法的白细 胞分类结果。由仪器白细胞分类原理可知，仪器对白细胞的分类不同于常规 的涂片染色分类。常规分类除细胞大小外，还要根据细胞的染色反应，核的 形态及染色质的着**况，胞质的着色及颗粒，才能确定为五类细胞。而血 液分析仪的白细胞分类只是根据溶血剂处理后的细胞大小而分为三种细胞群 体。白细胞直方图的变化反映的只是某种体积的颗粒，即某种大小的细胞， 而不是某种特殊细胞的变化。因此，不能用仪器分类代替常规方法的分类。 但在白细胞直方图及计数值均正常的情况下，可作为一种筛选方法。
