聚合酶的进化，为特殊需求量身定制生物酶
分析测试百科网讯 近日，Roche旗下Kapa Biosystems开发出了“直接进化ZL技术平台”（directed evolution technology platform）。这个平台运用遗传，基因工程，生物信息学等分子水平上的技术，基因经过多轮的突变，筛选和扩增，获得高品质的生物酶，而且还可以为特殊需求量身定制生物酶。
DNA 聚合酶作为聚合酶链式反应（PCR）的核心因素，在PCR中扮演中至关重要的作用，从某种意义来讲PCR技术就是耐热聚合酶的技术。生物医药领域所使用的大部分是野生型的DNA 聚合酶，如大家熟悉的Taq DNA聚合酶、pfu DNA聚合酶等天然形式存在的酶。因为酶分子自身的结构和功能都有限制，随着研究人员实验要求的提升和生物样本复杂性的提高，野生型DNA聚合酶的局限性也逐渐凸显出来，如扩增效率低，特异性差，高AT 或GC 含量样本扩增结果差，样本中或PCR 系统中有些抑制剂对反应有干扰等等。
图1：Kapa“直接进化“技术流程
KAPA 2G FAST DNA聚合酶，便是KAPA 通过“直接进化”技术生产的第二代工程酶之一，其兼具了扩增速度和灵敏度，以其为核心成分的KAPA2G Fast Multiplex Mix/KAPA SYBR/Probe FAST Universal mix，延伸时间缩短至1 sec/kb，实验时间缩短55%，且灵敏度更高，合成力更强，可兼容广泛的GC含量和产物长度。
图2 Kapa 2G Fast DNA Polymerase扩增速度1 Kb/sec，较野生型热启动酶扩增时间减少55%
图3 针对高/ 低GC 含量的模板，KAPA SYBR/probe FAST Universal master 相比竞争产品， 扩增效率更高， 线性更好
Kapa 2G Robust DNA聚合酶，更强的合成能力，用于解决广泛扩增子类型（富含GC或AT）的不一致扩增问题，并提高了对一般抑制剂的耐受性，适合于挑战性PCR应用和困难样本的扩增，显着降低使用多种酶和扩增方案的优化难度，灵敏度更高。
图4 对于富含GC 或AT 的靶标DNA，KAPA2G Robust DNA 聚合酶可以增加PCR 成功率
Kapa Long Range DNA聚合酶，结合了Taq DNA 聚合酶和古生菌(B-family) DNA聚合酶的优势，通过定向改造，拥有高保真的特性，可以扩增长达15Kb的DNA片段，适用于超长序列的扩增，同时具有高灵敏度、高产量的优势。
Roche Kapa Biosystems通过“直接进化”技术，定向改造了种类十分丰富的适用于多种不同实验目的的生物酶，满足不同的客户需求，各有特点。
