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IVF VS 自然合笼

2020.2.05

同学们有木有经历过小鼠繁殖了好几代目标小鼠的数量却一直达不到实验需求的情况?遇没遇到过实验室某个传了许多代的小鼠种群数量却越来越少,最后只有一只独苗的情况?

碰到这种自然繁育难题的时候,IVF(In vitro fertilization)技术就成为获得更多小鼠和稳定种群的最佳方式。所谓IVF就是将雌雄配子在体外受精并植入假孕母鼠体内获得子代小鼠的技术。

技术优势

通常的自然繁育方式是自然合笼,与自然合笼繁殖相比,IVF具有以下几个优势:

其实IVF对自然合笼的优势,我们从二者的繁育方案也能窥见一斑。以2对杂合子起始扩繁16对杂合子为例:

IVF方案

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自然合笼方案

我们可以看到,通过IVF的繁殖方式,经过一轮繁殖只需要2对杂合雄鼠就可以得到目的数量的子代;而对比自然合笼方法,同样两只突变雄鼠,繁殖时间多了将近半年。因此,IVF 作为一种优秀的代养繁殖手段应用在多种繁殖项目中。

操作流程

说过了IVF的优势,我们再简单和大家聊聊IVF的操作流程。

IVF操作具体分四步:

体外受精用培养皿准备

实验开始前一天在35 mm培养皿中加入2个200 μL TYH培养基液滴

精子的采集

(1) 将符合要求的性成熟(8周以上)的雄鼠颈椎脱臼处死,取出附睾上体尾部,去除脂肪与血迹后,置于一个TYH液滴内。

(2) 利用眼科剪在液滴内横断附睾尾,当精子充分游离出附睾尾后,将组织从液滴内取出,将培养皿置于培养箱。

 

图1. 雄鼠取精操作

卵母细胞的收集

处死超排后的雌鼠,取出两侧的输卵管,置入培养皿取出卵丘细胞团放入200 μL TYH培养基。

精卵混合

用10 μL移液器从精子滴吸取获能后的精子,加到卵子液滴中,根据卵团大小情况以及精子的活力每滴加8 μL左右的精子。将精卵混合后,把培养皿置于培养箱中培养。

体外受精完成后将胚胎移入假孕母鼠子宫,21天后小鼠就会出生了。

图2. 胚胎移植操作


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