如何设置一个PCR体系?
一般分为8步:
1、预变性:可用94~95℃,2~10min,一般用5min。
2、变性:一般用94℃,30s~2min,一般45s~1min。
3、退火:温度自定,30s~2min。
4、延伸:70~75℃,一般72℃,对于〈2kb,<1min;>2kb,每增加1kb加1min。
5、循环数:一般25~35个循环。
6、最终延伸:72℃,5~15min。
7、保存:10℃,时间设为0。
8、END。
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一般分为8步:
1、预变性:可用94~95℃,2~10min,一般用5min。
2、变性:一般用94℃,30s~2min,一般45s~1min。
3、退火:温度自定,30s~2min。
4、延伸:70~75℃,一般72℃,对于〈2kb,<1min;>2kb,每增加1kb加1min。
5、循环数:一般25~35个循环。
6、最终延伸:72℃,5~15min。
7、保存:10℃,时间设为0。
8、END。