全血基因组DNA提取试剂盒（50次）使用说明
全血基因组DNA提取试剂盒（50次）
试剂盒组成：
1．溶液A 25ml 5×STMT(用时按体积比1：4 用灭菌双蒸水稀释)
2．溶液B 17ml
3. 溶液C 0.6ml RNase A
4．溶液D 44ml
5. 溶液E 1.25ml Resin（用时充分混匀）
6. 溶液F 30ml 洗液(用时加入40ml无水酒精，并在瓶盖“口”中做标记)
7．溶液G 5ml TE 缓冲液
实验步骤:
(一)新鲜抗凝血或冷冻抗凝血
1．取300μl 全血,加入900μl 溶液A，温和混匀5～6 次。
2．室温或冰浴10min，≥8000rpm 离心20～30 秒，弃上清。
注：1）若红细胞溶解不完全，则沉淀物发红，可再加900μl 溶液A，重复上述步骤一次。
2）若全血在使用之前被冷冻，则需重复步骤1、2 两次。
3．加入300μl 溶液B，温和振荡或反复用移液器吸打白色沉淀物4～6 次，
加入10μl 溶液C，室温放置10min。
4．加入800μl 溶液D，20μl 溶液E，混匀，室温放置5min。
5．≥8000rpm 离心30s，弃上清。
6．加入500μl 溶液F,充分混匀，≥8000rpm 离心30～60s，弃上清。
7．重复步骤6。
8．≥12000rpm 离心1min，吸干剩余液体。室温放置5～10min。
9．加入50～100μl 溶液G，混匀，50℃保温5～10min，≥12000rpm 离心1min，吸取上清，
即为DNA。
(二)分离好的白细胞
1．取100μl 白细胞，按1：3 的比例直接加入溶液B，充分混匀，加入10μl 溶液C，室温
放置10min。
2． 其余接（一）的步骤4。
注注意事项：
1. 用户可视DNA 浓度高低，适当调整溶液G 的量。
2. 此方法提取DNA 质量非常高，适用于分子生物学任何实验要求，OD260/280≥1.5,一
般情况能达到1.7--1.8,若比值偏低，可能是溶血或储存时间过长。
