杆状病毒表达系统的空斑纯化法介绍
由于在重组病毒中多角体基因被外源基因所取代，因此形成的子代病毒不含有包含体，为包含体阴性病毒。包含体阴性病毒与包含体阳性病毒(由野生型病毒形成)在平板中形成的空斑形态是不同的。因此，可在光学显微镜下，利用这一特征筛选出含外源基因的重组病毒并加以纯化[12]。这正是目前使用最普遍的有效方法。
1、标志基因筛选
Vialard等[13]构建了一种含β-半乳糖苷酶标记的pJVNheI转染质粒，该质粒是在多角体基因启动子上游插入一个p10基因启动子，由它来驱使lacZ基因表达，当这种重组转染质粒与病毒DNA共转染昆虫细胞后得到的重组病毒即可在含X-gal的细胞培养物中形成蓝色噬斑，使筛选工作更加容易。因此得到提示，如果先构建出含lacZ的重组病毒，在此基础上再构建出含外源基因的重组病毒，将使筛选变得很容易。
2、其它方法
如有限稀释法[3]、DNA斑点杂交[3]也可用于筛选重组病毒，缺点在于不能精确地筛选出来源于单一重组病毒的毒株。
2003年英国University of Reading的Ian M. Jones首次通过在Bacmid上部分敲除Orf1629，构建了免空斑筛选的Bacmid。免除空斑筛选后，构建重组杆状病毒的时间由以前的大约三周迅速降低到一周。目前采用这种策略的有OET的FlashBAC和Bacmid Ltd.的qBac.
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