杆状病毒表达系统的影响蛋白质表达的因素
在杆状病毒系统中，要获得蛋白质的有效表达，首先要选择合适的转染载体。依据表达的蛋白质属融合型或非融合型，选择单启动子型或多启动子型。另外目的基因的选择要注意以下因素：①该目的基因应不含内含子；②去除其mRNA 5′端非编码区的异源序列；③翻译启始密码子AUG应处于适当的序列之间（如Kozak 序列），通常认为其上游 -3位的碱基为A时最佳；④去除mRNA 3′端的非编码区的非必需序列；⑤若用非融合型转移载体，基因需含自身的ATG启始密码，若用融合型转移载体则不必带上；⑥转移载体中已含有多聚腺苷酸加尾信号，外源基因无需再带上这类信号；⑦如果表达产物的信号肽不能被杆状病毒表达体系有效去除时，可考虑去除这类信号肽；⑧若表达产物不能稳定表达时，可对其N端进行改造或表达融合蛋白。 除此以外，细胞的种类和生理状态也是重组病毒繁殖的关键因素。蛋白质的低水平表达可能还与转录后加工、蛋白质转运、以及蛋白质本身的性质相关，可以采用融合表达来解决。
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