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关于瞬时转染的优点介绍

2022.11.11

  瞬时转染(transient transfection)是将DNA导入真核细胞的方式之一。在瞬时转染中,重组DNA导入感染性强的细胞系以获得目的基因暂时但高水平的表达。转染的DNA不必整合到宿主染色体,可在比稳定转染较短时间内收获转染的细胞,并对溶解产物中目的基因的表达进行检测。

  第一、操作简易和周期短。传统的稳定转化系统,从转化到获得转基因植株至少需要几个月甚至更长的时间,且转化效率比较低,瞬时表达系统仅需要2~4 周,避免了繁琐的植物组织培养过程(Kapila et al., 1997);

  第二、表达效率高。当单链的T-DNA 进入植物细胞后,不但转化到植物基因组中的基因可以表达,许多未整合到植物基因组中的游离外源基因同样可以表达,拷贝数更高。其表达不受基因位置和基因沉默的影响,因而表达效率更高,可达稳定转化表达量的数倍(Janssenand Gardner, 1990; Kapila et al., 1997; Yang et al.,2000; Wroblewski et al., 2005);

  第三、安全高效。稳定表达的转基因植物存在食物链污染,花粉传播引起的基因漂移等转基因安全问题(Twyan et al., 2003),瞬时表达中的基因转移及其表达是一个独立的过程,不产生可遗传的后代,其生物安全性要高的多,且试验结果更为直观可靠;

  第四、不需要筛选基因。稳定的转基因转化通常需要抗生素或其他筛选基因进行初步筛选,其转基因植株也相对存在着转基因安全问题,瞬时表达无需筛选基因,减少了转基因中抗生素等带来的不安全因素,同时载体可以更小,更容易转化较大的目的片段和多个基因;

  第五、能在完整植株上进行。在分析外源基因表达的互作与生物或非生物胁迫时,能够更真实的反应植物体内的基因表达模式。

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