VIE鱼类荧光标记的操作及使用方法
VIE鱼类荧光标记主要是使用与钙具有亲和性的荧光化合物作用于标记对象，使其沉积在耳石上以形成在荧光显微镜下可识别的荧光标志。自Douglas等发现盐酸四环素（TC）可沉积在鱼类骨骼和鳞片上，便开始了鱼类耳石化学标记的系统研究，化学标记可在鱼类任何生活史包括受精卵阶段开展，且耳石标志永久保存，常用于大规模标记。
至今已筛选出可用于标记的常用物质有土霉素（OTC）、盐酸四环素、茜素络合物（ALC）、茜素S（ARS）、钙黄绿素等[19]，四环素类是使用时间最长的标记物质，但标记效果却稍逊于ALC和ARS，钙黄绿素能较好地标记很多鱼类，但其使用的安全浓度较小，作用时间不易掌握。
VIE鱼类荧光标记放流标记由两部分硅有机树脂材质组成，在使用前混合。VIE标记线注射之前是液体，注入体内后很快变成适应生物体的固态物质。这些标记线植入透明或半透明的组织下面，保持从外表可见。在许多两栖动物身上，VIE标记线甚至可以透过黑色皮肤观察到。VIE标记线广泛应用于更多的水生动物，长须鲸、甲壳类动物、爬行动物和两栖动物。
VIE鱼类荧光标记途径有注射、浸泡或投喂含有标记物的饲料，研究表明茜素投喂或注射的标记效果都不理想，而浸泡标记效果明显，而钙黄绿素通过注射的标记效果优于浸泡。选用何种标记物及标记手段一般主要根据标记鱼的大小、生活史阶段、标记数量及资金预算等综合考虑。
耳石热标记是通过人为短期地对水温进行调控以改变耳石上的一个或多个生长轮纹的特征，形成终身可识别的标记。仅仅通过人工调控温度波动就能对胚胎、仔鱼耳石进行有效地大规模标记，方法简单，且费用低廉。该标记技术已在世界范围内得到广泛推广使用。
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