一种利用表面等离子共振定量流感病毒的新方法...（五）
表3：添加剂对回收的影响。参照抗原B/Jiangsu/lO/2005(5 ug/ml)与添加剂混合，并在B表面上分析样品。结果与HBS-EP+缓冲液中无添加剂的对照样品进行比较。
工艺样品的分析
为了测试生物传感器方法的性能，对流感疫苗纯化过程中不同阶段的样品进行了分析，从收集的细胞培养上清到过滤终产物。同一个样品还用SRID分析以进行比较。结果汇总见表4。样品经过稀释，这样一般每个样品的两次稀释能达到标准曲线范围内的浓度。每个样品重复两次，并计算出每次稀释的变异系数(CV)。对于大部分样品，两种方法的结果有着良好的一致性，但生物传感器测定与SRID相比，两次重复之间的CV要低得多且灵敏度更高。对于少数HA浓度高(>100 ug/ml)的样品，线性稀释很难实现。不过，这是生物传感器和SRID两种方法都有的，因此可认为源于样品，而不是稀释本身。
表4：样品类型Biocore [HA] (ug/ml) CV(％) n=2 SRID [HA] (ug/ml) CV(%) n=2
工艺样品的定量：结果来自生物传感器和SRID。
TBV，三价疫苗；MBV，单价疫苗；harvest，感染后的MDCK细胞培养物的上清；
UFD，超滤和渗滤；start，UFD过滤病毒，在10 mM NaP pH 7.4中稀释10陪；eluate，
三价疫苗分析
Biocore T100可将样品连续注射在四个流动槽中，每个流动槽有着独立的传感器表面。为了在同一个实验中分析三价疫苗，三个流动槽的传感器表面分别固定了HAA/H1Nl、A/H3N2和B。利用参照抗原和特异抗血清的三价混合物对来自三家制造商的疫苗进行分析(图7)。疫苗同时用SRID分析(在三块不同的凝胶上)。SRID和生物传感器方法的测定仍然很相似，且生物传感器方法的重复实验精确度更高。生物传感器方法的总分析时间为9小时，手工操作为1-2小时。而SRID分析的总时间为22个小时，手工操作为6-8小时。
图7三种市售疫苗的分析(A-C)。利用SRID(点状柱)和生物传感器(灰色柱)来定量疫苗。生物传感器分析在一块传感器芯片上进行。三个表面上分别固定了B、A/H1N1和A/H3N2
HA蛋白，单次实验中在所有三个表面上运行三价疫苗。重复实验的变异系数(CV％)显示在每个柱上方(n=2)。黑线代表疫苗中每个毒株的制造商标定浓度为30
ug/ml(每次剂量为15 ug)。no，未重复分析。
-
投融资
-
产品技术
-
科技前沿
