胰蛋白酶
制法要求
本品应从检疫合格的猪、羊或牛胰中提取所用动物的种属应明确,生产过程应符合现行版《药品生产质量管理规范》的要求。本品为动物来源,工艺中应进行病毒的安全性控制
性状
本品为白色或类白色结晶性粉末
鉴别
取本品约2mg,置白色点滴板上,加对甲苯磺酰-L精氨酸甲酯盐酸盐试液0.2ml,搅匀,即显紫色。
检查
酸度取本品,加水溶解并稀释制成每1ml中含2mg的溶液,依法测定(通则0631),pH值应为5.0~7.0溶液的澄清度取本品,加0.9%氯化钠溶液溶解并稀释制成每1ml中含10mg的溶液,依法检查(通则0902第法),溶液应澄清。糜蛋白酶照紫外可见分光光度法(通则0401)测定底物溶液取N-乙酰-L-酪氨酸乙酯23.7mg,置100ml量瓶中,加磷酸盐缓冲液(取0.067molL磷酸二氢钾溶液38.9ml与0.067mol/L磷酸氢二钠溶液61.1ml,混合,pH值为7.0)50ml,温热使溶解,冷却后再稀释至刻度,摇匀。冰冻保存,但不得反复冻融。供试品溶液取本品适量,精密称定,加0.001mo/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中含0.25mg的溶液测定法取底物溶液2.0nl、0.001mol/L盐酸溶液0.2ml与上述磷酸盐缓冲液(pH7.0)1ml,混匀,作为空白。精密量取供试品溶液0.2ml,加底物溶液(预热至25℃±0.5℃)3.0ml,立即计时并摇匀,使比色池内的温度保持在25℃士0.5℃,在237nm的波长处,每隔30秒读取吸光度,共5分钟,每30秒钟吸光度的变化率应恒定,且恒定时间不得少于3分钟。以吸光度为纵坐标,时间为横坐标,作图,取在3分钟内成直线部分的吸光度,按下式计算AP=0.00751×w×供试品效价(u/mg)式中P为每2500胰蛋白酶单位中含糜蛋白酶的量,单位;A2为直线上开始的吸光度;A1为直线上终止的吸光度;T为A2至A1读数的时间,分钟;W为测定液中含供试品的量,mg;0.0075为在上述条件下,吸光度每分钟改变0.0075,即相当于1个糜蛋白酶单位限度每2500单位胰蛋白酶中不得多于50单位的糜蛋白酶干燥失重取本品适量,以五氧化二磷为干燥剂,在60℃减压干燥4小时,减失重量不得过5.0%(通则0831)
效价测定
照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定底物溶液制成后应在2小时内使用。取N-苯甲酰L精氨酸乙酯盐酸盐85.7mg,加水溶解使成100ml,作为底物原液;取10ml,用磷酸盐缓冲液(取0.067mol/L磷酸二氢钾溶液13ml与0.067mol/L磷酸氢二钠溶液87ml混合,pH值为7.6)稀释成100ml,恒温于25.0℃±0.5℃,以水作空白,在253mm的波长处测定吸光度,必要时可用上述底物原液或磷酸盐缓冲液调节,使吸光度在0.575~0.585之间供试品溶液取本品适量,精密称定,加0.001mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中含50~60胰蛋白酶单位的溶液。测定法取底物溶液3.0ml,加0.001mol/L盐酸溶液200μl,混匀,作为空白。另精密量取供试品溶液2004,加底物溶液(恒温于25.0℃±0.5℃)3.0ml,立即计时,混匀,使比色池内的温度保持在25.0℃士0.5℃,在253nm的波长处,每隔30秒读取吸光度,共5分钟。以吸光度为纵坐标,时间为横坐标,作图;每30秒吸光度的改变应恒定在0.015~0.018之间,呈线性关系的时间不得少于3分钟。若不符合上述要求,应调整供试品溶液的浓度,再作测定。在上述吸光度对时间的关系图中,取成直线部分的吸光度,按下式计算。P 0.003TW 式中P为每1mg供试品中含胰蛋白酶的量,单位;A1为直线上终止的吸光度;A2为直线上开始的吸光度;T为A1至A2读数的时间,分钟;W为测定液中含供试品的量,mg;0.003为在上述条件下,吸光度每分钟改变0.003,即相当于1个胰蛋白酶单位
类别
蛋白分解酶
贮藏
遮光,密封,在阴凉干燥处保存。
制剂
注射用胰蛋白酶
