植物蔗糖含量的测定实验
实验方法原理
植物体内可溶性糖包括还原糖和非还原糖(主要是蔗糖)。因此测定蔗糖时,须先用盐酸将其水解为还原糖,再测定水解后的总还原糖含量,然后从总还原糖含量减去水解前还原糖含量即为蔗糖含量。 | |
实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | 分光光度计 电子分析天平 恒温水浴锅 25 ml刻度试管 50 ml容量瓶 100 ml三角瓶 试管架 移液管 移液管架 洗耳球 玻棒 |
实验步骤 | 1.葡萄糖标准曲线制作与上述还原糖含量测定相同。 2.样品中蔗糖的水解 精确吸取上述测定还原糖含量的糖分提取液10 ml置于100 ml三角瓶中,加6mol·L-1盐酸10 ml,摇匀,在沸水浴中加热10min,冷却后加入酚酞指示剂一滴,以10﹪氢氧化钠中和至溶液呈微红色,然后将提取液转入50 ml容量瓶中加蒸馏水稀释定容至刻度,待测。 3.样品中总还原糖的测定 取4 支25 ml刻度试管,编号,其中3支(三个重复)分别加入待测液2 ml,1支空白管加 2 ml蒸馏水,然后各管再加入DNS试剂1.5 ml,摇匀,混合液在沸水浴中加热5min,然后用自来水冷却,各加入21.5 ml蒸馏水使总体积为25 ml,摇匀,在520nm波长处测定吸光度(A)值。 |
其他 | 根据待测液的吸光度值从上述标准曲线查中出其相应的还原糖含量,然后按下公式计算出样品中可溶性糖总量和蔗糖总量的百分率。
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