核酸的定量测定实验——地衣酚显色法
| 实验方法原理 | RNA 与浓盐酸共热时发生降解, 产生的核糖又可转变为糖醛, 在FaCl3 或CuCl2催化下, 糖醛与3 , 5-二羟基甲苯( 地衣酚、苔黑酚)反应形成绿色复合物, 该产物在670 nm 处有最大吸收。当RNA 浓度为20～250 μg/ ml 时光密度与RNA 浓度成正比。 |
|---|---|
| 实验材料 | |
| 试剂、试剂盒 | |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | 1. RNA 标准曲线的制作: 取试管6 支, 按下表所示添加试剂。
加毕混匀, 于沸水浴中加热20 min , 取出置自来水中冷却,以零号管为对照, 于670 nm 处测光密度值。以光密度为纵坐标,RNA 浓度为横坐标作图, 绘制标准曲线。
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