农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验
实验材料
试剂、试剂盒 | |
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仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 从根癌农杆菌甘油原液中吸取 400 μl 加入含 10 ml MG/L 液体培养基并添加相应抗生素的 50 ml 无菌管中,28℃、250 r/min 摇床振荡培养过夜(17~20 h) 至 OD600nm =1.0~1. 5。 2. 农杆菌细胞在 4500 g 下离心 10 min 后,弃上清(见注 4 ),用 4 ml 的 1X 侵染培养基 重悬农杆菌细胞 。 3. 将重悬后含农杆菌的侵染培养基置于 50 ml 无菌管中,28°C 黑暗条件下摇床中振荡培养 1~3 h(见注 5 ) 。 |
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