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半固体马铃薯葡萄糖琼脂培养基配方

2020.2.05
中文名

半固体马铃薯葡萄糖琼脂培养基配方


英文名

SEMSOLID POTATO DEXTROSE


用途

培养基用于酵米面、变质银耳及其它淀粉类发酵食品引起的食物中毒样品中椰毒伯克霍尔德氏菌的产毒培养。


标准

GB/T 4789.29-2003


配方(g/L)

成分             含量(g/L)


马铃薯            300 (从中提取浸出)粉


葡萄糖            20


琼脂             7.5


最终   pH         5.6±0.2


原理

马铃薯提供各类氮源,碳源,维生素;葡萄糖提供能源;琼脂起固形作用。


用法
  1. 取瓶内半固体马铃薯葡萄糖琼脂培养基干粉31.5克,用1000ml蒸馏水或纯水溶解。搅拌加热煮沸至完全溶解(不能持续高温加热,建议不要重复煮溶),121℃高压灭菌20min,冷至约50℃,倾注灭菌平皿。 


2. 取已鉴定为椰毒伯克霍尔德氏菌的菌株接种PDA斜面,36±1℃培养24h,加入3ml灭菌生理盐水,制成约为100亿/ml的菌悬液,用无菌吸管吸取0.5ml,滴在铺好灭菌玻璃纸的板梯PDA平板上,用灭菌L玻璃棒涂布均匀,26±1℃培养5d。


3. 取下带菌的玻璃纸,将半固体平板放入消毒锅内,100℃流动蒸气锅灭菌30min。室温冷却后,置-10—-20℃冰箱过夜。将冰冻好的半固体平板置室温融化,用灭菌吸管取出冻融液,经滤纸过滤放灭菌试管或锥形瓶中,4℃避光保存。此为粗毒素。


质量控制
  1. 外观方面:


脱水干粉培养基:淡黄色粉末。


溶解后颜色:浅黄色


2. 生物学方面


下列质控菌株接种待测试培养基,26℃,5d结果如下:


质控菌株及编号指标质控评判标准椰毒伯克霍尔德氏菌ATCC33664生长率(半定量)倾注菌落数与PDA相当,玻璃纸上生长良好,成片生长,有黄色素


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