吞噬作用实验_粒细胞吞噬试验
人体和动物机体的吞噬细胞可根据其形态大小分为大吞噬细胞和小吞噬细胞,大吞噬细胞是指单核一巨噬细胞系统的细胞,小吞噬细胞主要是中性粒细胞。它们对外来的细菌或其他异物有吞噬、消化作用,是机体非特异性免疫的重要工具,同时也是特异性免疫的细胞成分,例如抗原递呈作用等。吞噬作用是检测吞噬细胞功能的最常用的方法之一。一般用吞噬了细菌或其他异物的吞噬细胞百分率和被吞噬的细菌或其他颗粒的数量(吞噬指数)来表示吞噬能力。
实验材料 | |
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试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 用装有最小针头的 1 ml 注射器在洁净凹玻片的凹孔内加入 0.02 ml 肝素溶液。 2. 用乙醇棉花消毒耳垂或手指,再用消毒针头刺破消毒处的皮肤,以血红蛋白吸管吸取血液 0.04 ml,立即放入以上凹孔内,轻轻搅动混匀。 3. 再用 1 ml 注射器加入约 0.02 ml 的白色葡萄球菌悬液,充分混匀。 4. 将凹玻片放入铺有数层湿纱布的培养皿或有盖搪瓷盘(先放 37℃ 温箱中预温)内,放 37℃ 温箱中作用 30 min,每隔 10 min 摇匀一次。 5. 取一小滴血液与白色葡萄球菌混合液于载玻片上,取另一边缘光滑的玻片用其边缘按图 1 推成薄片,待干。
6. 滴加甲醇固定 3 min,用水冲洗,晾干。 7. 用碱性美蓝染液染色 1~2 min,水冲洗,晾干。 8. 油镜下观察。数 100 个多形核白细胞中有多少个吞噬了细菌的,即为吞噬细胞百分数。 再数此 100 个多形核白细胞中一共吞噬了多少细菌,将此总数除以 100,得出每个白细胞吞噬细菌的平均数,即为吞噬指数。 |