吞噬作用实验
实验方法原理
实验材料 白色葡萄球菌悬液(6 亿个菌 毫升)
试剂、试剂盒 肝素溶液(25 单位 毫升)甲醇碱性美蓝染液消毒乙醇
仪器、耗材 血红蛋白吸管凹玻片载玻片1 ml 注射器针头棉球
实验步骤
1. 用装有最小针头的 1 ml 注射器在洁净凹玻片的凹孔内加入 0.02 ml 肝素溶液。
2. 用乙醇棉花消毒耳垂或手指,再用消毒针头刺破消毒处的皮肤,以血红蛋白吸管吸取血液 0.04 ml,立即放入以上凹孔内,轻轻搅动混匀。
3. 再用 1 ml 注射器加入约 0.02 ml 的白色葡萄球菌悬液,充分混匀。
4. 将凹玻片放入铺有数层湿纱布的培养皿或有盖搪瓷盘(先放 37℃ 温箱中预温)内,放 37℃ 温箱中作用 30 min,每隔 10 min 摇匀一次。
5. 取一小滴血液与白色葡萄球菌混合液于载玻片上,取另一边缘光滑的玻片用其边缘按图 1 推成薄片,待干。
6. 滴加甲醇固定 3 min,用水冲洗,晾干。
7. 用碱性美蓝染液染色 1~2 min,水冲洗,晾干。
8. 油镜下观察。数 100 个多形核白细胞中有多少个吞噬了细菌的,即为吞噬细胞百分数。
再数此 100 个多形核白细胞中一共吞噬了多少细菌,将此总数除以 100,得出每个白细胞吞噬细菌的平均数,即为吞噬指数。
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