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膜片钳技术在神经药理方面的应用(3)

2021.6.07

  2. 溶液的组成

  (1) 电极液:根据记录的电流不同电极液的成分也不同。基本要求是等张的KCI 溶液,Ca2+ 浓度为10~100nmol (pCa 7~8),pH 值7~7.4。这里介绍一个在全细胞记录模式时,通过改变保持电位,能分别记录到Na+、K+、Ca2+ 电流的电极液成分(mmol/L):K Aspartic 49.89,KCI 30.37, KH2PO4 25,HEPES 20.12,EGTA 0.999,KOH 29.95,MgCI2 1,CaCI2 0.2,ATPNa2 6.8。用KOH 调pH 至7.4。如果要记录纯的Na+、K+、Ca2+ 电流,则需要使用相应的工具药。

  HEPES(N-2-hydroxyethyopiperazine-N’-2-ethanesulfonic acid,羟乙基哌嗪乙烷磺酸)

  (2) 细胞外液(浴槽液):分离细胞和记录电流时应用。分离神经细胞主要用人工脑脊液(artificial cerebrospinal fluid solution,ACSF),成分(mmol/L):NaCI 124,KCI 2.5,NaH2PO4 1.25,MgSO4 2.0,CaCI2 2,NaHCO3 26,glucose 10。该液体需要通以95%O2+5%CO2 混合气体。如果用HEPES 作缓冲系,则ACSF 的成分如下(mmol/L):NaCI 140,KCI 2.5,MgCI2 1,CaCI2 1,glucose 25,HEPES 10。

  上述溶液的配制均使用去离子水。

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