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primer primer5怎么设计引物

2022.8.12

首先打开软件
左上角来操作
file——new——dna sequence
这一项可以把你复制的序列粘贴进去
当然,你也可以选择另一个
file——open——dna sequence
去open一个新的文件。在接下来的界面里
复制你的序列,于是就将序列导入了点击search
进入下图界面开始设计引物
在此图中有6个部分,红色数字标示
1区,包括三部分,可以选择设计pcr引物,测序引物和杂交探针
2区,搜寻模式,包括正链,反链等,我们一般选最后一项pairs,出来一组引物
3区,引物的范围,上游引物所在范围,下游引物所在范围
4区,pcr 长度,根据需要设置
5区,引物长度,这个是调整的重点,前面是长度,后面是±
6区,选择模式,一般选auto,也可以手动下面是一个设计
我选择了
正链位于1-400内
负链位于500-910内
产物长度100-600
引物长度为20±1bp

输入后,出现下图界面
共有1000多条引物
点击ok

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