荧光原位杂交实验的步骤
探针变性：将探针在75℃恒温水浴中温育5min，立即置0℃，5～10min，使双链DNA探针变性。
切片置于65℃下过夜烘烤。
二甲苯中室温脱蜡2次，每次10分钟，随后浸入100%乙醇中5分钟。
切片依次室温置于100％乙醇、85％乙醇和70％乙醇中各两分钟复水。将组织切片室温浸入去离子水中3分钟，用无绒纸巾吸取多余的水分。
50℃下用30%酸性亚硫酸钠（sodium bisulfite ）处理组织切片20－30分钟。
于2XSSC溶液中漂洗2次，每次5分钟。
取0.4ml蛋白酶K储存液（20mg/ml）溶于40ml 20XSSC(pH 7.0)得到蛋白酶K工作液（200µg/ml）；将组织切片浸泡在蛋白酶K工作液中，37℃下孵育20-30分钟。
组织切片经蛋白酶K消化后，于2XSSC溶液中漂洗2次，每次5分钟。
将组织切片置于0.1M HCl中室温浸泡5-10分钟，于2XSSC溶液中漂洗2次，每次5分钟。
将组织切片玻片依次置于-20℃预冷的70%乙醇、85％乙醇和100％乙醇中各2分钟脱水。
将组织切片室温浸入丙酮溶液中2分钟。
自然干燥玻片，加热玻片至56℃。
将已变性或预退火的探针10 μL 滴于已变性并脱水的玻片标本上，盖上18×18盖玻片，用Parafilm封片，置于潮湿暗盒中37℃杂交过夜（为防止杂交液蒸发，此过程在湿盒中进行）。
将已杂交的玻片标本放置于已预热42～50℃的体积分数50%甲酰胺/2×SSC中洗涤3次，每次5 min。
在已预热42～50℃的1×SSC中洗涤3次，每次5 min。
自然干燥玻片，DAPI复染。
荧光显微镜观察结果。
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