酶联免疫吸附(ELISA)测定伤寒杆菌“O”抗体实验
测定伤寒杆菌“O”抗体
酶联免疫吸附试验是用酶标记的抗体(或SPA)检测未知抗原或抗体的方法。此法敏感性高,特异性强。常用的是ELISA方法,间接法,双抗体法和抗原法。
实验材料 | |
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试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 抗原包被 取洁净的聚苯乙烯微量反应板,于每孔内加伤寒抗原0.1毫升(用包被缓冲液稀释,蛋白含量10微克/毫升),置37℃1小时,弃抗原液,用洗涤液3次每次3分钟。
于每孔内分别加不同稀释度(如1:5,1:10,1:20…1:80)的待测血清,PBS空白对照,阴性对照血清,阳性对照血清各0.1毫升。置37℃30分钟,洗涤3次。
于每孔加酶联A蛋白各0.1毫升,置37℃20分钟,洗涤3次。
若颜色于阴性对照相同则为阴性,若较阴性对照深则为阳性,根据颜色深浅以(+)表示。 展开 |
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