你遇到过D-二聚体的非特异性结合吗？
D-二聚体是纤维蛋白单体经活化因子XIII交联后，再经纤溶酶水解所产生的一种降解产物，是一个特异性的纤溶过程标记物。D-二聚体主要反映纤维蛋白溶解功能，只要机体血管内有活化的血栓形成及纤维溶解活动，D-二聚体就会升高。目前，D-二聚体在临床上主要用于弥漫性血管内凝血（DIC）的早期诊断、深静脉血栓（DVT）及肺栓塞的筛查、急性脑梗死的早期诊断、治疗和愈后观察等。
【案例经过】
心内科李老师是我们学校毕业的大师兄，在我们校友会里比较有威望，我与他因为工作的原因接触很多，平时也在微信里打打闹闹。一天他在微信里和我探讨他的一个病人。这个病人大概是心衰合并肺水肿，大概住院已一星期有余，最近查凝血七项，其他都正常，只是D-二聚体总是莫名的升高，并且高出参考范围很多。但是病人的其他指标不支持肺栓塞也没有血栓的症状，不知道是不是我们检验科的结果有问题。大师兄的疑问引起了我的注意。一上班就去关注了这个病人，他的生化项目、免疫项目（类风湿因子、冷凝集实验、抗O、肿瘤标志物）都没有问题，可就是他的D-二聚体确实很高达到了1200ug/L，看了那天的凝血质控，咨询了管凝血机器的操作老师，并没有什么特殊情况。询问后，抽血和血量都没问题且两次的凝血D-二聚体都异常，暂时排除质量前的问题。只是个案，说明还是患者的标本自身问题，但是问题出在哪呢？无计可施之时，笔者又做了一遍，结果还是这样。只能用最后一个大招了：找工程师。
【心得体会】
工程师小李对这些机器的脾气摸得很透彻。他拿出了D-二聚体的说明书，粗略的浏览了一遍。原来问题出现在检测原理上，希森美康的CA7000血凝仪检测D-二聚体的原理是免疫比浊法，利用抗原抗体的结合反应被检物质的浓度，既然是免疫比浊自然就会存在钩状效应和非特异性抗原抗体反应，对于钩状效应稀释模式会克服，那就是非特异性反应了。又去查询一番，提示如果怀疑为抗原抗体非特异反应可以用逐倍稀释的方法确认。有了方向，小李和我马上行动起来，对凝血样本采取2倍、4倍、6倍、8倍、10倍的稀释，并统一上机检测。结果很快出来了：
很明显，D-二聚体的浓度并不是线性关系，基本确定样本存在非特异性的抗原抗体反应，干扰了D-二聚体的检测。笔者下班后电话联系了大师兄，大师兄听后很满意，并表示以后会和检验科多进行交流。
【分析探索】
本案例出现的问题主要还是检测方法所导致，非特异性结合导致免疫比浊出现假阳性，那D-二聚体的检测还会不会有其他的干扰呢？
D-二聚体的检测法主要有乳胶凝集法、酶联免疫法、免疫比浊法等[1]
。目前在临床上最常用的方法是免疫比浊法，其操作简单、快速、稳定，便于临床诊断、用药，监测该方法检测D-二聚体具有较好的特异性和敏感性[2]
。所以此法得到更广泛应用。我院使用的希森美康CA7000检测D-二聚体就是使用的这种方法。其基本原理是：以被检物作为抗原，制备相应的多克隆抗体，利用抗原抗体的特异结合反应来对被检物进行定量检测，其复合物量与吸光度呈正相关，因此当抗体量固定时，根据复合物的吸光度值，即可推算出待测D-二聚体的含量。
但是无论使用哪种检测方法，我们平时所得结果与兄弟医院的一致性都不太尽如人意，主要是D-二聚体检测没有国际标准，Dempfle CE[3]
指出，D-二聚体测定结果很大一部分取决于单克隆抗体的性质。抗体对D-二聚体不同片段有不同的亲和力，抗原表达的时间依赖性、检测的形式、血浆中抗原呈现的基质效应等，使得不同方法的检测性能不一样，因此有时会出现不同医院同一标本不同试剂检测结果不同的现象。这些问题的出现使得我们在日常工作中要更加细心、耐心的对待每一份标本，更有责任心的发出每一份报告。遇到问题、解决问题，积累方法、积累经验更好更准的完成每一次检测。
参考文献：
[1] 栾耀芳．血浆Ｄ－二聚体检测方法及临床应用［J］．医学检验与临床，2007，18(4)：61-62．
[2] 郑美琴,李承,江明华.免疫比浊法测定D-二聚体的临床实验评价［J］．温州医学院学报,2005，35( 2) : 157-159．
[3] Dempfle CE. Validation, calibration and specificity of quantitative D-dimer assays［J］．Semin Vasc Med，2005，5(4)：315-320.
