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牛陀螺状细胞贴壁培养技巧

2020.2.01

BT牛陀螺状细胞贴壁生长特性:

1、一个一个做!防止污染,和消化细胞时间的不均匀。

2、原则上,为了避免细胞系之间的污染,应该一个一个的做。但是如果你能保证无菌操作的原则,也能把握好各种贴壁细胞系消化的时间,是可以同时做,这样效率高。建议你刚开始一个一个的做,熟练以后根据具体情况决定如何做。

3、4个可以同时做,时间到了用移液枪给4个瓶加含血清的培养基终止就行。

4、新手的话强烈建议一个一个处理细胞,特别是消化,除非你养的细胞对消化都不敏感,不然很容易消化过度或者不到位。另外同时处理多个细胞容易出现细胞间交叉污染,一旦污染基本没救,比细菌污染还要麻烦。

5、刚开始还是一个一个来,BT牛陀螺状细胞消化的时间与细胞的来源有很大关系,贴壁性强的细胞,需要消化的时间较长。一般除了贴壁性强的癌细胞外,细胞消化时间1-3min,还有胰蛋白酶的浓度有关系,浓度高的消化时间要短一些,不然会消化过了,对于细胞的生长不好。你可以在分散打入胰蛋白酶时,轻晃培养瓶,在显微镜下看见细胞开始变亮,皱缩,卷边的时候就加入培养液或者血清终止消化。

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