3M环境李斯特菌测试片操作以及判读（一）
一、测试环境李斯特菌数 操作方法
1. 将未开封的测试片贮藏在<= 8 oC (46 oF)的环境下，并在包装上标示的有效期内使用。在高湿度的地方，最好在使用前将测试片回复到室温。
2. 已开封的测试片，将开口反折，用胶带封好。
3. 为防止暴露于潮湿的环境中，请不要冷藏已开封的测试片。将胶带封好的测试片贮藏在低温干燥的地方，保持时间不超过1个月。请勿将测试片放在温度> 25 oC (77 oF)和(或)相对湿度> 50%的环境中。
4. 用涂抹棒、海棉或其它采样设备收集环境样本。湿润采样设备的液体应<= 10 mL。湿润剂可以是无菌水、缓冲蛋白胨水(Buffered Peptone Water, BPW)，或中和缓冲液，如Letheen肉汤或Dey/Engley (DE)中和肉汤。
5. 在无菌环境下在收集的样品中添加5 mL，20-30oC，灭过菌的缓冲蛋白胨水(BPW)溶液。 不要将Petrifilm EL测试片与Vermont 培养基(UVM)、Fraser肉汤、李斯特菌增菌培养基 (LEB)或缓冲李斯特菌增菌培养基(BLEB)共用。
6. 混合，蠕动或旋转样品与BPW的混合液将近一分钟。将样品置于室温(20-30 oC) 1h，最久不超过1.5 h，以修复损伤的李斯特菌。
7. 将测试片置于平坦表面处，揭开上层膜。
8. 用3MTM电子移液枪或其它移液器垂直滴加3 mL样品到下层膜的中央。
9. 将上层膜缓慢盖下，以免产生气泡。
10. 轻轻地将塑料压板放在位于接种区上层膜上。不要压，扭转或滑动压板。提起压板。等至少10分钟，以使胶体凝固。
11. 将测试片透明面朝上，可叠放至10片，在35oC ± 1oC或37oC ± 1oC下培养28h ± 2 h。
12. Petrifilm EL测试片能够用标准的菌落计数器或其它光学放大器计数或判读。不要计数圆形轮廓上的菌落，因为它们不受选择性培养基的作用。
