3M环境李斯特菌测试片操作以及判读（三）
4. 培养后，进行菌落计数 (在本例中，假设菌落数为90)。
1. 用1 mL液体湿润涂抹头，涂抹采样面，如面积为50平方厘米(50 cm2).
2. 将涂抹棒放回无菌容器中，添加5 mL缓冲蛋白胨水(BPW)。
3. 修复完成后，吸取3 mL混合液接种到Petrifilm EL 测试片。
4. 培养后，进行菌落计数 (在本例中，假如菌落数为90)。
二、测试环境李斯特菌 判读方法
3MTM PetrifilmTM Environmental Listeria(EL) 测试片是一种预先制备好的培养基，含有选择性试剂，营养成分，冷水可溶性的凝胶和有助于菌落检测的显色指示剂。Petrifilm EL 测试片可用于检测或计数环境样本中的李斯特菌数。Petrifilm EL 测试片检测的李斯特菌包括单核增生李斯特菌(L.monocytogenes) 英诺克李斯特菌 (L.innocua)，格氏/墨氏李斯特菌(L.grayi/murrayi)，威尔李斯特菌(L.welshimeri)，但不能区分各种菌。
环境条件和消毒剂可能会抑制或损伤微生物。缓冲蛋白胨缓冲液(Buffered Peptone Water, BPW) 能用作修复肉汤和Petrifilm EL测试片结合使用。但李斯特菌在缓存蛋白胨缓冲液中的修复过程不是增菌步骤。
1. 图1 为长有李斯特菌的典型Petrifilm EL 测试片。判读或计数所有的紫红色菌落为李斯特菌。如果在26-29 小时，有灰色或淡粉红色菌落存在，需继续培养。在培养时间内，由灰色或淡粉红色加深为紫红色的菌落应判定为李斯特菌。在最大培养时间(30小时)仍保持灰色或淡粉红色的菌落不应判读为李斯特菌。不考虑或计数圆形轮廓上的菌落，因为它们不受选择性培养基的作用。
定性判读： 测试片检出李斯特菌。
半定量判读：李斯特菌的含量应记录为对采样区域和企业标准有指导意义的形式(如低，中，高，或可接受和不可接受)。
定量判读： 测试片上的李斯特菌数：11。
请参考判读手册的“定量采样与判读”部分来计算每个环境样本中的李斯特菌数。
2. 该Petrifilm EL 测试片在培养30小时后没有菌落生长，实验结束。
