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His抗体推荐—Abbkine全系列His标签抗体

2020.6.22

His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小,并且较容易分离和纯化,His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His抗体可以用于检测和His标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测His融合表达蛋白等。然而,目前商品化His 蛋白三维结构图His-tag的单克隆抗体(mAb)种类不多, 且价格也十分昂贵。

如何选择合适的His标签抗体?

我们在选择His抗体时,主要根据自己的需要,特别是实验应用上的需要。其中需要考虑的因素包括了,His抗体的应用检测类型、His抗体的克隆性及制备来源等。比如该His抗体是否能用于Western Bloting的检测?是否可以用于免疫荧光IF实验?我是否需要特异性更好的单克隆His标签抗体?我是否需要考虑下是选择小鼠来源的还是兔来源的His抗体?

之前有使用SSS(一家著名品牌的His标签抗体,名称隐去)的His标签抗体,一开始还好,过了半年后,就发现产品质量不稳定,做IF实验不行了,后来试用了下Abbkine的,IF结果很漂亮,顺带还买了他们的DyLight荧光二抗 —— 广州南方医科大学一客户

一般来说,应用类型越多,在使用过程中的选择余地就越大,而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外,抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面,也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl His抗体(假如其WB检测的稀释比率是1:5,000,最终使用液相当于500ml),要比效价低的1ml的His抗体(假如WB检测的稀释比率是 1:200,最终使用液相当于2ml)性价比更高。因此在选择抗体的时候,不但需要考虑抗体的量,还需要考虑抗体的效价,即不同应用的建议稀释比率。

为什么推荐Abbkine品牌的His抗体?

供应His抗体的进口品牌有很多,包括Sigma、Novagen、Qiagen、Abcam等,其中Abcam有一款值得推荐的His抗体,品名为6X His tag® antibodyab18184-6X His tag® antibody [HIS.H8] ——Abcam His抗体 [HIS.H8] (货号为:ab18184),该抗体是Abcam推荐的唯一5星级His标签抗体,可用于IF/ICC、IP以及WB实验,截止到2013年,使用该抗体发表在NCBI统计的文章有16篇(详情请点击:6X His tag® antibody [HIS.H8])。该抗体为单克隆抗体,克隆号为HIS.H8,该抗体2013年的中国报价为¥4418/100μl。Abcam的抗体在品牌知名度、质量以及售后方面都是很值得推荐的,然后其价格较高。

在此,我们向您推荐Abbkine的His标签抗体,Anti-His Tag Monoclonal Antibody (5C3)(货号A02050),该抗体实际上与上述Abcam抗体来源相同。与Abcam一样,其免疫原是6x His合成多肽,可识别可识别His重组蛋白和在细胞内过表达的His标记重组蛋白。然而其价格比Abcam低65%以上。Abbkine作为美国一家生产型品牌,为多个国际知名品牌提供OEM服务,因此其价格低廉,其质量也经受过市场检验。该抗体可以用于Western Bloting、免疫细胞化学及免疫荧光ICC/IF和免疫沉淀IP实验等多种不同应用。

一个高效价的抗体不仅影响实验结果的灵敏度,还意味着更高的性价比。Abbkine的His标签抗体在常规的WB实验里,推荐的起始稀释比率为1:1000,实际在Abbkine的应用中,还有1:4,000甚至更高的稀释比率,需要根据客户具体的实验条件进行优化。该抗体在免疫细胞化学及免疫荧光ICC/IF中同样表现优秀,5C3克隆的His标签抗体识别的免疫决定簇非常适合ICC/IF的应用。IP免疫沉淀反应也是客户选择Abbkine的一个重要原因。另外,Abbkine还同时提供经HRP偶联的His标签抗体,尤其适合IP-WB验证时去除二抗的干扰;兔源多克隆His抗体也为客户提供另一种His标签的检测方案。


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