运用ACQUITY Arc可靠地对肽图分析方法进行转换（二）
结果与讨论
从Agilent 1100系列HPLC系统到ACQUITY Arc系统的HPLC肽图方法转换实现了方法等效性
为了评估肽图方法从Agilent 1100系列HPLC系统转换到ACQUITY Arc系统时的方法等效性，我们采用如上所述的方法参数建立了英夫利昔单抗的肽图。根据以前的评估结果，我们在
ACQUITY Arc系统中配置了一个主动预加热器(CH-30A)，以确保两个系统可实现相当的温度控制水平5。首先在Agilent 1100系列HPLC系统上运行分离，建立一个基准结果(图1A)。然后，维持所有方法参数不变，将该方法转换至ACQUITY Arc系统。实验结果表明，两个系统之间存在185 μL的梯度补偿体积。因此我们在进样之后应用Gradient SmartStart技术6来补偿两个系统之间的延迟体积差异。该功能可相对于进样对梯度进行调节，而无需更改梯度表。ACQUITY Arc系统所得的色谱图如图1B所示。两个系统生成的色谱图显示出良好的一致性。
图1：图1. 英夫利昔单抗的肽图对比，分别采用A)Agilent 1100系列HPLC系统和B)应用了梯度补偿的ACQUITY Arc系统采集数据。实验计算了所有标记峰的相对保留时间。色谱峰的选择由洗脱位置和强度决定。相对保留时间依据峰1计算。
为进一步评估结果的可比性，我们研究了保留时间。表1列出了52个峰的保留时间，两个
系统所得的对应色谱峰的保留时间之间略有差异，而对应色谱峰的相对保留时间之间的
差异小到可以忽略不计。借助采用GradientSmartStart技术的流路1，我们在不改变任何方
法参数的前提下成功地将HPLC方法转换到了现代LC平台上。
表1. 比较图1中Agilent 1100系列HPLC系统和ACQUITY Arc系统鉴定出的52个色谱峰的保留时间。采用Gradient SmartStart技术补偿两个系统之间的延迟体积差异。通过计算所得的
_值可以看出，由补偿体积造成的相对保留时间差异几乎可以忽略不计。
