GB/T 42216.3-2022
分子体外诊断检验 福尔马林固定及石蜡包埋组织检验前过程的规范 第3部分：分离DNA
Molecular in vitro diagnostic examinations—Specifications for pre-examination processes for formalin-fixed and paraffin-embedded (FFPE) tissue—Part 3:Isolated DNA
GBT42216.3-2022, GB42216.3-2022
- 标准号
- GB/T 42216.3-2022
- 别名
- GBT42216.3-2022, GB42216.3-2022
- 发布
- 2022年
- 采用标准
- ISO 20166-3:2018 IDT
- 发布单位
- 国家质检总局
- 当前最新
- GB/T 42216.3-2022
- 引用标准
- GB/T 22576.1-2018 GB/T 27020-2016 ISO 15189 ISO 15190
- 适用范围
- 本文件提供了在进行分子分析之前的检验前阶段,用于DNA检验的福尔马林固定和石蜡包埋组织(FFPE)样本标本处理、记录、贮存及取材的指南。 本文件适用于分子体外诊断检验,包括医学实验室和分子病理学实验室进行的实验室自建检测项目,也适用于实验室客户、体外诊断开发者和制造商、生物样本库、从事生物医学研究的机构和商业组织以及监管机构。 注:国际、国家及区域法规要求同样适用于本文件涉及的特定内容。
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一步脱蜡法在FFPE样本DNA提取中的应用
什么是FFPE福尔马林固定石蜡包埋技术（Formalin-Fixed and Parrffin-Embedded, FFPE）是一种组织保存技术。这种技术为了维持细胞核蛋白结构，先用福尔马林固定然后将组织用固体石蜡包埋，以供切片后作组织学诊断或研究使用。FFPE技术的应用福尔马林由于可以与蛋白氨基发生不可逆交联，所以对保持组织细胞结构的完整性、抗原可测定性、组织渗透性方面均优于其他固定液。...
石蜡包埋组织DNA提取方法
但是，Moerkert等认为未螺旋化DNA不影响进行点杂交分析。 3．免疫DNA机械性损伤福尔马林固定和石蜡包埋使组织变得坚韧，很难达到匀浆的效果。经常的做法是将组织切在3－5µm薄片，使每一细胞都被切开但是，我们认为切片太薄，容易对过多地将DNA切断，影响高分子DNA的获得率。最好是采用15－20µm的厚切片，高浓度蛋白酶K消2－4天，使能达到细胞充分破碎、蛋白肖化的目的。...
石蜡包埋组织ＤＮＡ提取的基本方法
但是，Moerkert等认为未螺旋化DNA不影响进行点杂交分析。3．免疫DNA机械性损伤福尔马林固定和石蜡包埋使组织变得坚韧，很难达到匀浆的效果。经常的做法是将组织切在3－5μm薄片，使每一细胞都被切开但是，我们认为切片太薄，容易对过多地将DNA切断，影响高分子DNA的获得率。最好是采用15－20μm的厚切片，高浓度蛋白酶K消2－4天，使能达到细胞充分破碎、蛋白肖化的目的。...